BeyoMag™ Streptavidin Magnetic

碧云天的BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠)，也称Streptavidin磁珠或SA磁珠，由高质量的链霉亲和素 (Streptavidin, SA)与超顺磁性纳米级磁珠共价偶联而成，能够快速、高效、灵敏、特异性地与生物素(Biotin)标记的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等分子结合。主要用于分离纯化生物素标记的核酸、抗体、蛋白或相关复合物等，用于免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)、细胞分选、DNA-蛋白相互作用研究等。

Streptavidin的分子量为55kD，可以高度特异性地和生物素(Biotin)结合。Streptavidin和生物素的亲和常数为 K_d=10^-15M。Streptavidin是一个4聚体蛋白，可以同时结合4个生物素分子。Streptavidin的中文名为链霉亲和素，从Streptomyces adidiniil中纯化获得，和鸡蛋清来源的Avidin(亲和素)在空间结构以及与生物素的亲和力方面具有高度的相似性。和Avidin不同的是，Streptavidin是一种非糖基化蛋白，并且基本不带电荷。Avidin的pI=～10.5，在中性pH条件下呈碱性。由于Streptavidin和Avidin相比在中性条件下不带电荷，因此Streptavidin的非特异性结合比Avidin低很多，这样检测时的非特异性背景就低很多。因此目前在生物素检测时通常使用Streptavidin替代Avidin。

链霉亲和素磁珠在生物医药领域内应用非常广泛，可以特异性地结合生物素标记的抗原或者抗体，作为免疫沉淀、细胞分选、ELISA等反应的载体；结合生物素标记的DNA或RNA片段，从细胞或组织提取物中分离特定的核酸-蛋白质复合物，用于蛋白质与核酸相互作用研究；结合生物素标记核酸探针，用于DNA、RNA杂交实验或mRNA的分离和纯化等；还可用于纯化单链生物素标记DNA寡核苷酸、分离生物素标记PCR产物等。本产品的实验流程参考图1。

图1.碧云天BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads (链霉亲和素磁珠)的实验流程图。

本产品结合量容量高。与同类的很多产品相比，本产品具有非常高的结合容量，对复杂样品中生物素标记的分子可以快速进行分离纯化，而且磁珠粒径小，不易产生非特异吸附。本产品每毫升磁珠悬浊液含约10mg磁珠，含有≥0.6mg高质量链霉亲和素蛋白，每毫克磁珠可结合≥20μg生物素化标记兔IgG，可高效地进行免疫沉淀等实验。

本产品特异性强。本产品可特异性地结合生物素化的抗体、核酸、蛋白、多肽、凝集素等配体分子，获得的产物纯度高，可进一步用于Western、ELISA、Northern、qPCR、质谱分析等一系列后续的分析测试。

本产品结合生物标记分子速度快，吸附时间短，可快速高效结合配体。本产品所使用的纳米级磁珠(~200nm)具有超大比表面积，有效缩短了链霉亲和素与生物素结合所需的时间。缩短操作时间可以避免在长时间操作过程中配体分子的降解，有效保持配体分子的活性及完整性。

本产品使用便捷。本产品储存在特殊保护液中，不含甘油，磁性分离，无需离心。本产品不仅适用于少量样本的检测，也适用于高通量筛选(high-throughput screening)的自动化操作系统，不同操作方法之间一致性高。

本产品的主要指标如下表：

Characteristics	Description
Product content	10mg/ml magnetic beads in specific protective buffer
Beads size	~200nm
Magnetization	Superparamagnetic
Coupled protein	Streptavidin
M.W. of protein	~55kDa (Streptavidin)
Protein concentration	≥ 0.6mg streptavidin per ml beads
Binding capacity	per mg beads: ≥20μg biotinylated antibody or dsDNA, ≥1000pmol free Biotin, ≥400pmol biotinylated oligonucleotides or peptides
Specificity	Biotinylated ligands
Elution method	Elution with acid or SDS‐PAGE loading buffer for single-use applications
Application	purification of biotin-labeled proteins and nucleic acids, IP, Co-IP, DNA-protein pulldowns

如果每个用品使用20μl磁珠，每毫升本产品可以用于50个样品

包装清单：

产品编号	产品名称	包装
P2151-200μl	BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads	200μl
P2151-1ml	BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads	1ml
P2151-5ml	BeyoMag™ Streptavidin Magnetic Beads	5ml
－	说明书	1份

保存条件：

4℃保存，两年有效。长期不使用，可以-20℃保存，-20℃可以保存更长时间。

注意事项：

本产品需维持pH为6-8，避免高速离心、干燥；请勿长时间将磁珠置于磁场中，否则可能会引起磁珠聚团。

本产品使用前要适当充分重悬，即颠倒若干次使磁珠混合均匀，混匀操作须轻柔，不宜剧烈涡旋震荡等，避免蛋白变性等。

在免疫沉淀或纯化时，建议设计阳性和阴性对照组。

待结合分子的类型、大小及生物素标记方式和程度等都会影响结合效率，建议通过稀释法来确定每种具体应用的磁珠用量，同时可以考虑加大磁珠用量至待结合分子2-3倍摩尔数量以确保结合充分。

游离生物素会降低本磁珠的结合能力，因此在生物素标记蛋白或核酸后，需要用脱盐柱等方法去除多余的游离生物素。

蛋白样品收集后宜尽快完成纯化工作，并应始终放置在4℃或冰浴，以减缓蛋白降解或变性。为有效抑制蛋白降解，可以在蛋白样品中添加适量的蛋白酶抑制剂混合物，例如碧云天的P1005/P1006蛋白酶抑制剂混合物(通用型)、P1048/P1049 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(通用型, 质谱兼容, 50X)、P1010/P1011 蛋白酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 100X)、P1050/P1051 蛋白酶磷酸酶抑制剂混合物(哺乳动物样品抽提用, 50X)等。

如果使用真空泵等仪器吸取上清液，须注意真空泵的吸液强度，以免吸力过大而吸取到聚集的磁珠。

酸性溶液洗脱时磁珠可能会发生聚集，属于正常现象，不影响磁珠的正常使用。0.1%的非离子型去垢剂(如Triton X-100、Tween-20或NP-40)可有效防止磁珠聚集，并且不会影响磁珠的抗体结合效率。

酸性溶液洗脱或使用SDS-PAGE洗脱后的磁珠不可重复使用。为了尽量减少链霉亲和素的脱落，无论是手动操作还是自动操作，低pH洗脱步骤都不要超过10分钟。

高浓度的DTT、巯基乙醇、盐酸胍等对本产品与标签蛋白的结合可能有一定影响，但Western及IP细胞裂解液(P0013)、RIPA裂解液(P0013B/C/D)或NP-40裂解液(P0013F)等都完全适用。碧云天生产的不同裂解液的主要特点和差异，以及如何选择裂解液可参考我们的相关网页：http://www.beyotime.com/support/lysis-buffer.htm。

本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。

为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。