伪狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸检测试剂盒(荧光-PCR

伪狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)客户只需提供样品和待检测名称即可。由我们提取RNA，设计并合成引物，完成荧光定量PCR实验以及后续数据分析，提供实验报告给您。
PCR实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。 
    10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM）   
              2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl） 
  1 μl      加ddH2O至 50 μl
   视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。 4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强

FAS/CD95(Mouse Factor-related Apoptosis) ELISA Kit  小鼠凋亡相关因子     96T
ADH ELISA Kit  大鼠乙醇脱氢酶     96T
T  睾酮     96T
E2  雌二醇     96T
ET3  游离三碘甲状腺原氨酸T3     96T
ALDH ELISA Kit  大鼠乙醛脱氢酶     96T
EGF(Human Epidermal growth factor) ELISA Kit  人表皮生长因子     96T
Mouse Slit2 ELISA Kit   小鼠Slit2     96T
bFGF(Human basic fibroblast growth factor) ELISA Kit  人碱性成纤维细胞生长因子     96T
sCD14 ELISA Kit  大鼠可溶性CD14     96T
A Beta1-42(Mouse amyloid beta peptide 1-42) ELISA Kit  小鼠β淀粉样蛋白1-42     96T
MIP-5(Human macrophage inflammatory protein 5) ELISA Kit  人巨噬细胞炎性蛋白5     96T
MIS/AMH)ELISA Kit  大鼠缪勒管抑制物质/抗缪勒管激素     96T
8-OHdG(Mouse 8-Hydroxy-desoxyguanosine) ELISA Kit  小鼠8羟基脱氧鸟苷     96T
IL1Ra(Mouse Interleukin 1 receptor antagonist) ELISA kit  小鼠白介素1受体拮抗剂     96T
sE-selectin(Human soluble E-selectin) ELISA Kit  人可溶性E选择素     96T
androgen ElISA Kit  大鼠雄激素     96T
sICAM-1(Human Soluble Intercellular Adhesion Molecule-1) ELISA Kit  人可溶性细胞间粘附分子1     96T
TLR4 ELISA Kit  大鼠Toll样受体4     96T
PCT(Mouse Procalcitonin) ELISA Kit  小鼠降钙素原     96T
IAA(Mouse insulin autoantibodies) ELISA Kit  小鼠胰岛素自身抗体     96T
DAT ELISA Kit  大鼠多巴胺转运蛋白     96T
ICAM-2/CD102(Human intercellular adhesion molecule 2) ELISA Kit  人细胞间粘附分子2     96T
ICAM-3/CD50(Human intercellular adhesion molecule 3) ELISA Kit  人细胞间粘附分子3     96T
GP210(Mouse Anti-glucoprotein 210)ELISA Kit  小鼠抗核膜糖蛋白210抗体     96T
D2R ELISA Kit  大鼠多巴胺D2受体     96T
A Beta1-42 ELISA Kit  大鼠β淀粉样蛋白1-42     96T
CTGF(Human connective tissue growth factor) ELISA Kit  人结缔组织生长因子     96T
伪狂犬病毒通用型(PRV-gB)核酸检测试剂盒(荧光-PCR法)IL-7(Mouse Interleukin-7) ELISA kit  小鼠白介素7     96T
MT(Mouse Melatonin) ELISA Kit  小鼠褪黑素     96T
IL-18(Human Interleukin 18) ELISA KIT  人白介素18     96T
CD44 ELISA Kit   大鼠CD44分子     96T
8-OHdG ELISA Kit   大鼠8羟基脱氧鸟苷     96T
Apo-H(Mouse Apolipoprotein H) ELISA Kit  小鼠载脂蛋白H     96T
MEC/CCL28(Human mucosae associated epithelia chemokine) ELISA Kit  人粘膜相关上皮趋化因子     96T
IL1Ra ELISA Kit  大鼠白介素1受体拮抗剂     96T
BAFF-R(Human B cell activation factorr from the tumor necrosis factor family receptor) ELISA Kit  人B细胞活化因子受体     96T
HSF1(Mouse Heat Shock Factor 1) ELISA Kit  小鼠热休克因子1     96T
VEGFR-3/Flt-4(Human Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 2) ELISA kit  人血管内皮细胞生长因子受体3     96T
IAA ELISA Kit   大鼠胰岛素自身抗体     96T实时荧光定量PCR：
实时荧光定量PCR技术有效地解决了传统定量只能终点检测的局限，实现了每一轮循环均检测一次荧光信号的强度，并记录在电脑软件之中，通过对每个样品Ct值的计算，根据标准曲线获得定量结果。因此，实时荧光定量PCR无需内标是建立在两个基础之上的： 1）Ct值的重现性PCR循环在到达Ct值所在的循环数时，刚刚进入真正的指数扩增期（对数期），此时微小误差尚未放大，因此Ct值的重现性极好，即同一模板不同时间扩增或同一时间不同管内扩增，得到的Ct值是恒定的。 2）Ct值与起始模板的线性关系由于Ct值与起始模板的对数存在线性关系，可利用标准曲线对未知样品进行定量测定，因此，实时荧光定量PCR是一种采用外标准曲线定量的方法。 外标准曲线的定量方法相比内标法是一种准确的、值得信赖的科学方法。利用外标准曲线的实时荧光定量PCR是迄今为止定量最准确，重现性定量方法，已得到全世界的公认，广泛用于基因表达研究、转基因研究，药物疗效考核、病原体检测等诸多领域。
定量PCR方法：
a、竞争法
选择由突变克隆产生的含有一个新内切位点的外源竞争性模板。在同一反应管中，待测样品与竞争模板用同一对引物同时扩增（其中一个引物为荧光标记）。扩增后用内切酶消化PCR产物，竞争性模板的产物被酶解为两个片段，而待测模板不被酶切，可通过电泳或高效液相将两种产物分开，分别测定荧光强度，根据已知模板推测未知模板的起始拷贝数。 b、内参照法
在不同的PCR反应管中加入已定量的内标和引物，内标用基因工程方法合成。上游引物用荧光标记，下游引物不标记。在模板扩增的同时，内标也被扩增。在PCR产物中，由于内标与靶模板的长度不同，二者的扩增产物可用电泳或高效液相分离开来，分别测定其荧光强度，以内标为对照定量待检测模板。
c、PCR－ELISA法
利用di高辛或生物素等标记引物，扩增产物被固相板上特异的探针所结合，再加入抗di高辛或生物素酶标抗体－辣根过氧化物酶结合物，最终酶使底物显色。常规的PCR－ELISA法只是定性实验，若加入内标，作出标准曲线，也可实现定量检测目的。