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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期:
6个月
- 保存条件:
2-8℃
- 规格:
50T/48S
货号:HP560
规格:50T/48S
可见分光光度法
产品组成:
| 试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
| 试剂一 | 液体 25 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
| 试剂二 A | 液体 5.1mL×1 瓶 | 4℃保存 |
| 试剂二 B | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
| 试剂三 | 液体 40 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
| 标准液 | 液体 1 mL×1 支 | 4℃保存 |
1、 试剂一工作液:临用前按试剂一(mL):浓硫酸(μL)=5:12 的比例按需配制;
2、 试剂二:临用前配制,取试剂二 A 全部加入到试剂二 B 瓶中,混匀;
3、 标准液:2 μmol/mL 钾标准液。临用前用蒸馏水稀释 5 倍即 0.4 μmol/mL 的标准溶液。
产品说明:
钾保持机体的正常渗透压及酸碱平衡,参与糖及蛋白代谢,保证神经肌肉的正常功能。血清钾高于5.5mmol/L 时称高血钾,高血钾可使神经、肌肉应激性增高,使心肌应激性降低,导致心动过缓,血清钾超过10毫摩尔/升时, 可发生心室纤颤,甚至心脏在舒张期停跳。血清钾低于3.5mmol/L时称低血钾,低血钾可引起肌无力甚至肌肉弛缓性麻痹,引起心肌应激性增高,出现心动过速、心律紊乱甚至在收缩期停跳。因此,血清钾是常用的生化测定指标。血清中钾离子与四苯硼钠作用,形成不溶于水的四苯硼钾,产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比。 通过测定其浊度来测定血清钾含量。
指标:
低检出限:0.0095 μmol/mL线性范围:0.05-1.5 μmol/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:可见分光光度计、离心机、可调式移液枪、1mL 玻璃比色皿、浓硫酸和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)血清预处理:取 EP 管,依次加入 50μL 血清,450μL 试剂一工作液,充分混匀后室温(25℃左右),8000rpm,离心 10min,取上清液,待测。
二、测定步骤
- 分光光度计预热 30min 以上,调节波长到 520nm,蒸馏水调零。
- 试剂三置于 25℃水浴中预热 30min 以上。
- 操作表:
| 加入试剂(μL) | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
| 蒸馏水 | 200 | ||
| 标准液 | 200 | ||
| 上清液 | 200 | ||
| 试剂二 | 100 | 100 | 100 |
| 混匀后静置 5 min | |||
| 试剂三 | 700 | 700 | 700 |
| 混匀后于 520 nm 立即测定吸光度,分别记 A 空白管、A 测定管、A 标准管。 | |||
三、血钾浓度计算
血钾浓度(μmol/mL)=[C 标准液×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)]×样本稀释倍数=4×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)
C 标准液:0.4μmol/mL;样本稀释倍数:(50μL 血清+450μL 试剂一)÷50μL 血清=10。
注意事项:
1、采血后宜尽早进行血清钾测定,时间过长会影响血清钾含量。2、如果样本吸光值大于1.2,建议将样本用试剂一工作液稀释后进行测定。
实验实例:
1、 取小鼠血清按照测定步骤操作,测得 A 测定管=0.636,A 空白管=0.012,A 标准管=0.397,计算得: 血钾浓度(μmol/mL)=4×(A 测定管-A 空白管)÷(A 标准管-A 空白管)=6.48 μmol/mL。风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验在检测试剂盒的设计上。典型 HMT 检测试剂盒用 3H-SAM 作甲基供体,并将 S-腺苷高半胱氨 酸 (SAH) 测定为甲基化反应的一般副产物。但是,这需要 处理放射性物质 较高的灵敏度,以克服甲基供体 SAM 的低 kcat(转化数通常 预先纯化酶/蛋白复合物,以评估特定 HMTs 的活性 比色或荧光检测简便,无放射性 与核提取物或纯化蛋白的相容性(检测试剂盒对目标修饰具有特异性) 3 小时内即可提供数据 表征去甲基酶活性 组蛋白去甲基化酶活性检测试剂盒通常测定
10% 胎牛血清。细胞培养物均根据 ATCC 的建议使用标准细胞培养方法维持和收获。 球状体形成的初始接种密度取决于细胞类型、球状体形式的生长期持续时间以及分析时球状体所需尺寸等因素。为更好地评估球状体的形成和生长,使用 96 孔球形微孔板在每孔 100 µL 生长培养基中以 40、200、1,000、5,000 和 10,000 个细胞的密度进行接种。通过CellTiter-Glo® 3D细胞活力测定法在 0、24、48 和 72 小时分别对球状体培养物进行分析。上述所有细胞系采用同一接种
环化以及缩短或删除环区等步骤来提高。决定蛋白质高热稳定性的两个主要因素被认为是氢键增加和离子键网络的形成 [ 8~10] 。 然而,由于分子水平上对蛋白质热稳定性仍未有完整的认识,把蛋白质改造成热稳定性高的蛋白质仍然是个难题[ (11 ] 。计算和比较研究法用于识别其稳定作用并已经成功地加以应用 [ 12~14 ] 。然而它们必须依赖于有良好分辨率的晶体或核磁共振结构。结构中能清楚地看到 Cα 的轮廓,并且能获得许多同源序列,最好是嗜热来源的。此外,模拟达尔文优化循环“突变、重组和选择”的进化方法
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