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1
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- 细胞形态:
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- 运输方式:
顺丰快递
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- 生长状态:
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- 规格:
T25/1*10^6
产品规格:T25/1*10^6
传代方法:消化3-5分钟。1:2传代,3天内可长满。
培养体系:温度37℃ ,气相 95%空气 ,5%CO2
细胞描述:本库的细胞仅用于科研工作,未经许可不得用于其他目的,使用者不得将本库细胞转让给第三者。
冻存条件:无血清细胞冻存液
AML12小鼠肝细胞来源收到后处理:
细胞在培养瓶中培养至良好状态后灌满完全培养液并封好瓶口是细胞运输的最好办法。收到细胞回到自己的实验室后,先打开外包装,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超净台内,严格无菌操作,培养箱静置2-4小时。镜下观察:未超过80%汇合度时,可将瓶装的完全培养液收集至离心管中,加入6ml完全培养基,放入37℃、5%CO2孵箱培养;超过80%汇合度时,根据情况传代或者冻存,具体操作见细胞培养步骤。(注意发货的是密封培养瓶的话,放入培养箱培养记得培养瓶盖子拧松,传代后建议一瓶用原瓶里面的完全培养基,另外一瓶用自己配的完全培养基)
AML12小鼠肝细胞来源培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL完全培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的完全培养基终止消化。
3.轻轻吹打细胞,完全脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法三:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量胰酶,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。
PS:若客户收到2ml小管细胞,收到细胞后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超净台或安全柜内,严格无菌操作;将小管细胞转移至T25培养瓶或6cm培养皿,加入5ml左右完全培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞密度:若密度未超过80%,换液继续培养,视情况传代或者冻存。若密度超过80%,可直接进行传代(方法同上)。
AML12小鼠肝细胞来源售后服务告知书
1)细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
1. 细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、瓶身破损、培养液严重漏液等,重发;
2. 细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果,核实后重发;
3. 常温发货的细胞静置24小时后,干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后,绝大多数细胞未存活,(需提供真实清晰的细胞状态照片),重发;
4. 干冰冻存发货的细胞复苏后24小时后或常温发货的细胞静置4小时候并且未开封,出现污染,重发;
5. 细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,核实后予重发;
6. 细胞收到当天以及第2,3天请拍照,3天未告知的,视为产品合格。4-7天内出现问题有提供收到细胞前3天照片和细胞出现问题时照片以及细胞相关操作的详细步骤的,并跟技术人员沟通的,由技术人员判定为我方责任的,重发。技术人员判定为双方承担责任的由双方进行协商处理或者按合同价的50%收费重发。
二)细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
1. 客户造成细胞污染,不重发;
2. 客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
3. 非本库推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
4. 细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
5. 细胞培养时经其它处理的,不重发;
6. 细胞收到2天内,未告知,不重发;
7. 视具体情况而定。
注:由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素的影响,本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态,故客户需要售后是需收到细胞期间间隔时间不能大于7天,支原体污染问题最好是收到即测,支原体售后不能大于3天。
欢迎新老客户咨询订购:AML12小鼠肝细胞来源
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文献和实验类器官类型或特定细胞类型形成组装体来提升。图像代表小鼠肝脏组装体,PDGFRα–H2B–GFP标记门脉成纤维细胞核(绿色),核tdTom标记导管细胞核(品红色),肝细胞核显示为蓝色,鬼笔环肽染色显示细胞骨架(白色)。 c:通过生物打印、水凝胶模具或脱细胞支架生成2.5维类组织结构,实现结构复杂性。下方图像代表用于形状引导的定制微流控芯片(左图),以及在带有激光雕刻管状支架的微流控芯片上培养的组织干细胞来源人类成人肠道类器官(右图)。细胞染色显示E-钙黏蛋白(E-cad)与醛缩酶B(AldoB)。 d
Nature(IF=48.5)具有代谢功能的人成体肝细胞类器官的构建!
本文献研究首次建立可长期扩增且保留完整代谢功能的人成体肝细胞类器官(HHO),通过Wnt+STAT3双通路激活(关键因子为抑瘤素M,OSM)解决了体外肝细胞“扩增就丢失功能、保功能就无法扩增”的trade-off难题。OSM既能强力驱动增殖,又能阻止胆管化生,维持肝细胞身份。该类器官可在小鼠肝脏内定植重建、形成代谢分区,并完整复现胆汁酸合成、脂质代谢、药物代谢、糖异生、尿素循环等全部核心肝功能;同时支持高效基因编辑,可构建糖原贮积病、尿素循环障碍等代谢肝病模型。该体系为肝病机制研究、药物
,在小鼠体内尾静脉注射AAV-LungX后,荧光蛋白或Luc的转基因表达聚集在小鼠肺部;同时对于小鼠肝脏、心脏、脾脏、肾脏等脏器观察发现,AAV-LungX基本不会在肝脏等脏器中滞留。 尾静脉注射AAV-LungX转导肺脏(5E+11vg/只;左:小动物活体成像结果;右:荧光结果) 尾静脉注射AAV-LungX转导Cdh5-CreERT2;R26RtdTomato小鼠(5E+11vg/只) 2、具有肺内皮细胞亲嗜性 肺
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