- ￥150 - 430
- 普利莱
- P1652-100/500
- 北京
- 2025年12月13日
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- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
//
- CAS号：
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- 保质期：
一年
- 供应商：
普利莱
- 保存条件：
室温
- 规格：
100ml/500ml
| 规格： | 100ml | 产品价格： | ￥150.0 |
|---|---|---|---|
| 规格： | 500ml | 产品价格： | ￥430.0 |
适用： 硝酸纤维素膜或PVDF膜。使用前膜可以保存在PBS或TBS缓冲液，也可以室温干燥保存数月。干的PVDF膜应该先用甲醇泡5分钟。
安全性：无毒无味。按照普通化学品安全规范进行操作和处置。
储存： 室温保存，一年有效。温度过低可能出现浑浊。
操作步骤：
- 将膜充分浸泡于适当体积的再生液中，于摇床上室温孵育6~8分钟。孵育时间的长短应参考后面的说明进行优化。
- 用镊子取出膜，用自备Western Blot洗涤缓冲液或普利莱封闭洗涤缓冲液（B1009）洗膜三次，每次8分钟。
- 此时膜上抗体已去除，膜已再生。用脱脂奶粉或BSA封闭，进行下一轮Western Blot实验。
1. 膜再生或Stripping的实质是在不影响膜上结合的抗原的条件下，将与抗原分子结合的一抗和二抗洗脱下来。有许多因素影响抗体从膜上的洗脱，如膜的类型、抗体类型和浓度及其与抗原结合特性等。按下面的说明优化再生液中孵育膜的时间至关重要。
2. 确定膜上抗体是否去除与优化再生液中孵育膜的时间：用ECL工作液孵育再生后的膜约1分钟，然后进行X光胶片曝光并显影，可确定膜上的抗体是否完全去除。如显示条带，表明抗体未完全去除，应继续将膜浸泡在再生液中孵育。然后再次ECL 检查膜上抗体是否去除。重复此步骤直到抗体完全去除并确定最佳孵育时间。
3. 由于至今尚不清楚的原因，使用脱脂奶粉封闭的膜要比使用BSA封闭的膜上的抗体更容易被Strip下来。因此准备进行Strip的膜，应该使用脱脂奶粉而不是BSA封闭。
4. 尽量避免使用干燥保存的膜，因为干的膜上的抗体很难被Strip干净。
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文献和实验， 转移效率高；而后者适用于大胶的蛋白转移，所用缓冲液少。以下为槽式湿转的 操作步骤。 1. 将胶浸于转移缓冲液中平衡 10min。 注意：如检测小分子蛋白，可省略此步，因小分子蛋白容易扩散出胶。 2. 依据胶的大小剪取膜和滤纸6 片， 放入转移缓冲液中平衡10min。 如用P VDF 膜需用纯甲醇浸泡饱和 3-5 秒钟。 3. 装配转移三明治： 海绵 3 层滤纸 胶 膜 3 层滤纸 海绵， 每层放好后， 用试管赶去气泡。切记：胶放于负极面(黑色面)。
，但若明确其中主要试剂的作用，所提取的质粒DNA 的纯度及质量会更高。笔者通过不同的试剂进行摸索，现将结果报告如下。1 材料和方法1. 1 材料1. 1. 1 实验菌株 使用菌株为大肠杆菌DH5α，菌株内含质粒pB I121，该质粒上克隆一h IL212基因。1. 1. 2 主要试剂 氨苄青霉素、RNaseA购自华美生物工程公司; DL15000、DL2000核酸分子量标记购自TAKARA公司;其它各种常规化学试剂均为分析纯。1. 2 方法1. 2. 1 质粒DNA的提取[ 1 ] 采用4种不同
糖类从组织化学技术的角度分类与生物化学的分类并非一致。从组织化学的角度，糖类可略分为多糖、中性糖液物质和酸性粘液物质及粘蛋白和粘脂质。 多糖主指糖原，是由许多葡萄糖分子以糖苷键组成的聚合体。当机体死亡，即很快分解为葡萄糖。 一、过碘酸—Schiff氏法（简称P.A.S）操作方法： （1）石蜡切片脱蜡至水。 （2） 0.5%过碘酸水溶液5分钟。或1%过碘酸95%酒精溶液（过碘酸再结晶应重新配制使用）。
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