上海大鼠肾衰竭模型构建

一、模型构建的主要方法及操作步骤

1. 手术法
   （1）5/6肾切除术

   • 操作流程：
     ① 一期手术：麻醉大鼠（乙mi或戊ba比妥），暴露左肾，切除上下极各1/3肾皮质（约2/3肾组织），止血后缝合。
     ② 二期手术：术后1周切除右肾，最终保留约1/6肾组织。
   • 改进方法：部分研究采用一次性结扎左肾动脉分支并切除右肾，减少出血和感染风险。
   • 病理机制：残余肾单位高灌注、高滤过导致肾小球硬化及间质纤维化，符合人类慢性肾衰竭进展特点。

   （2）肾动脉分支结扎法

   • 操作流程：在显微镜下结扎左肾动脉分支（保留1支），造成2/3肾梗死，1周后切除右肾。
   • 特点：与5/6切除法病理相似，但手术出血风险较低。

   （3）电凝加切除法

   • 操作流程：电灼器烧灼幼鼠肾表面（间隔1.2mm），7天后切除对侧肾。
   • 病理特征：肾皮质萎缩、肾小球减少、间质纤维化及微循环障碍。

2. 化学法
   （1）腺嘌呤模型

   • 给药方式：
     ① 灌胃法：250 mg/(kg·d)连续灌胃，或2.5%混悬液分阶段给药（如连续14天后隔日给药）。
     ② 饲料法：含0.75%腺嘌呤饲料喂养7周，后续灌胃巩固。
   • 机制：腺嘌呤代谢产物沉积于肾小管，引发梗阻性损伤及间质纤维化。
   • 病理特征：肾小管扩张、间质肉芽肿及纤维化，伴随贫血（红细胞、血红蛋白下降）。

   （2）阿霉素模型

   • 操作：一次性阴茎静脉注射6.0 mg/kg，诱导肾小球足细胞损伤。

   （3）顺铂模型

   • 操作：单次腹腔注射5-7 mg/kg，3天内血肌酐显著升高，模拟急性肾小管坏死。

3. 其他方法

   • 冷冻法：液氮冷刀冷冻左肾多个部位，2周后切除右肾。
   • 缺血/再灌注法：结扎左肾动脉45分钟再灌注24小时，同时切除右肾，模拟急性肾损伤。

二、模型评估指标

1. 生化指标

   • 血肌酐（Scr） ：≥2 mg/dL（176.8 μmol/L）。
   • 尿素氮（BUN） ：≥50 mg/dL（17.85 mmol/L）。
   • 24小时尿蛋白：显著高于对照组。

2. 病理学指标

   • HE染色：肾小球硬化、肾小管萎缩、间质纤维化。
   • Masson染色：胶原沉积量化纤维化程度。

3. 功能学指标

   • 肾小球滤过率（GFR） ：显著降低。
   • 血压：术后6-10周收缩压升高至肾性高血压标准。

4. 分子标志物

   • TGF-β1、α-SMA：表达上调，反映纤维化进展。