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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
新德里超级细菌PCR试剂盒
New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)
产品简介:New Delhi Metallo-beta-Lactamase-1 Bacteria (NDM-1,Superbug)
超级细菌(New Delhi-Metallo-1,NDM-1)指那些对多种抗生素具有耐药性的细菌,该细菌能对抗生素有强大的抵抗作用,能逃避被杀灭的危险,超级细菌容易引起细菌感染而不是传染病,而且一般发生在医院里,虽然它耐药性强,致病力不强,但是由于大部分抗生素对其不起作用,超级细菌对人类健康已造成极大的危害,因此超级细菌检测具有重要的意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化,专一性强,只扩增超级细菌。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料,PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL(亮黄色) |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL(蓝色) |
| 超级细菌PCR 引物混合液 | 13-62700yw | 100 μL(白盖) |
| 超级细菌PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 13-62700pc | 100 μL(黄盖) |
| 天净沙DNA释放剂试用装 | 130982 | 50次(试用装 |
| 使用手册 | 13-62700sc | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1.如果有N个样品,必须设置N+2个提取,多出的一个是PC(样品制备阳性对照),一个是NC(样品制备阴性对照)。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样,以此作为PC。另外用水作为NC。
2.用自选方法纯化样品的DNA,本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂,本产品的裂解液可以直接作为PCR模板,省略了DNA提取步骤。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 超级细菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| 样品制备阴性对照 | - | 18 μL | - |
| 样品制备阳性对照 | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
94℃ | 20 sec |
| 58℃ | 20 sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。对没有扩增产物的样品,可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
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文献和实验相关实验
检测超级细菌如果发现疑似耐药性反应,就会将其送到“临床基因扩增检验实验室”作基因分析,最快两三天就可以确认。郭绪雷/摄 □本报记者 张思玮 “超级细菌”风暴时至今日,似乎已经渐渐淡出人们的视线。 去年8月,“超级细菌”首次在英国著名医学期刊《柳叶刀传染病》刊发后,便引起了公众的普遍关注,甚至还夹杂有恐慌的情绪。 文章作者英国卡迪夫大学医学院蒂莫西·沃什声称,“超级细菌”NDM-1具有超强的抗生素耐药性,此种菌株对所有β
卫生挑战,在印度最为普遍,尤其是在幼儿中,尤其是随着抗菌药物耐药性的蔓延。只要遵循简单的规则,包括适当的卫生和卫生条件以及持续洗手,就可以很容易地预防伤寒。2008年,这条河还导致了水传播超级细菌新德里金属β-内酰胺酶(NDM)-1和NDM-4的发展,它们以惊人的速度传播,导致两年后世界卫生组织发出警告。废物不仅污染河水,导致疾病风险,而且还助长了抗生素耐药性的扩散。公共卫生工作受污染的水每年造成数百万例这种疾病。评估供水质量和卫生设施与人类健康之间关系的流行病学研究结果差异很大,开展这类研究涉及
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