转基因构建35S启动子-hsp增强子PCR试剂盒

转基因构建35S启动子-hsp增强子PCR试剂盒产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
2  上游引物  0.2μl
3  下游引物  0.2μl
4 dNTP  0.1μl
5  逆转录酶MMLV  0.5μl
6  DEPC水  5μl
7  RNA模版  2μl
8  总体积  10μl
轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5μl，37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。

盒
肝细胞粘附分子抗体    COAA ELISA Kit    辅激活因子激活因子(COAA)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶5抗体    ACTN4 ELISA Kit    辅肌动蛋白α4(ACTN4)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶1抗体    ACTN3 ELISA Kit    辅肌动蛋白α3(ACTN3)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶2抗体    ACTN2 ELISA Kit    辅肌动蛋白α2(ACTN2)ELISA试剂盒
磷酸化HOMER3蛋白抗体    ACTN1 ELISA Kit    辅肌动蛋白α1(ACTN1)ELISA试剂盒
转化蛋白p21抗体    FUR ELISA Kit    弗林蛋白酶(FUR)ELISA试剂盒
转录因子HES-1抗体    CLDN9 ELISA Kit    封闭蛋白9(CLDN9)ELISA试剂盒
组蛋白H4-K4甲基转移酶抗体    CLDN8 ELISA Kit    封闭蛋白8(CLDN8)ELISA试剂盒
HOMER3蛋白抗体    CLDN7 ELISA Kit    封闭蛋白7(CLDN7)ELISA试剂盒
磷酸化HER3受体抗体    CLDN6 ELISA Kit    封闭蛋白6(CLDN6)ELISA试剂盒
磷酸化HER4抗体    CLDN5 ELISA Kit    封闭蛋白5(CLDN5)ELISA试剂盒
磷酸化HER4抗体    CLDN3 ELISA Kit    封闭蛋白3(CLDN3)ELISA试剂盒
羟类固醇脱氢酶17β3抗体    CLDN25 ELISA Kit    封闭蛋白25(CLDN25)ELISA试剂盒
羟基类固醇脱氢酶11β1抗体    CLDN24 ELISA Kit    封闭蛋白24(CLDN24)ELISA试剂盒
滋养层细胞抗原抗体3β-HSD抗体    CLDN23 ELISA Kit    封闭蛋白23(CLDN23)ELISA试剂盒
乙酰化组蛋白H4抗体    CLDN22 ELISA Kit    封闭蛋白22(CLDN22)ELISA试剂盒
磷酸化高迁移率核小体结合蛋白1    CLDN20 ELISA Kit    封闭蛋白20(CLDN20)ELISA试剂盒
附睾分泌蛋白4抗体    CLDN2 ELISA Kit    封闭蛋白2(CLDN2)ELISA试剂盒
三甲基化组蛋白H3抗体    CLDN19 ELISA Kit    封闭蛋白19(CLDN19)ELISA试剂盒
三羟基三甲基辅酶A还原酶抗体    CLDN17 ELISA Kit    封闭蛋白17(CLDN17)ELISA试剂盒
硫酸乙酰肝素蛋白多糖2    CLDN16 ELISA Kit    封闭蛋白16(CLDN16)ELISA试剂盒
转基因构建35S启动子-hsp增强子PCR试剂盒肝癌相关抗原抗体hca25a    CLDN15 ELISA Kit    封闭蛋白15(CLDN15)ELISA试剂盒
己糖激酶3抗体    CLDN14 ELISA Kit    封闭蛋白14(CLDN14)ELISA试剂盒
人乙肝病毒pre S1/S2蛋白抗体    CLDN12 ELISA Kit    封闭蛋白12(CLDN12)ELISA试剂盒
人乙肝病毒pre S1蛋白抗体    CLDN11 ELISA Kit    封闭蛋白11(CLDN11)ELISA试剂盒
己糖激酶1抗体    CLDN10 ELISA Kit    封闭蛋白10(CLDN10)ELISA试剂盒
己糖激酶2抗体    CLDN1 ELISA Kit    封闭蛋白1(CLDN1)ELISA试剂盒
热休克蛋白90α抗体    CPOX ELISA Kit    粪卟啉原氧化酶(CPOX)ELISA试剂盒
肝细胞源性纤维蛋白原相关蛋白1抗体    SPP2 ELISA Kit    分泌型磷蛋白2(SPP2)ELISA试剂盒
红细胞分化相关基因蛋白抗体    SCGB2A2 ELISA Kit    分泌球蛋白家族2A成员2(SCGB2A2)ELISA试剂盒
同源异型盒基因HOXA13抗体    SCG5 ELISA Kit    分泌粒蛋白Ⅴ(SCG5)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶4抗体    SCG3 ELISA Kit    分泌粒蛋白Ⅲ(SCG3)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶7抗体    SCG2 ELISA Kit    分泌粒蛋白Ⅱ(SCG2)ELISA试剂盒
磷酸化组蛋白去乙酰化酶4抗体    SECTM1 ELISA Kit    分泌跨膜蛋白1(SECTM1)实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。