转基因元件小麦热激蛋白基因终止子PCR试剂盒

转基因元件小麦热激蛋白基因终止子PCR试剂盒产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
2  上游引物  0.2μl
3  下游引物  0.2μl
4 dNTP  0.1μl
5  逆转录酶MMLV  0.5μl
6  DEPC水  5μl
7  RNA模版  2μl
8  总体积  10μl
肠型脂肪酸结合蛋白抗体    IL27 ELISA Kit    白介素27(IL27)ELISA试剂盒
生长抑制因子基因1抗体    IL26 ELISA Kit    白介素26(IL26)ELISA试剂盒
白介素8抗体    IL25 ELISA Kit    白介素25(IL25)ELISA试剂盒
整合素连接激酶-1抗体    IL23R ELISA Kit    白介素23受体(IL23R)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体    IL23 ELISA Kit    白介素23(IL23)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体    IL2Rα2 ELISA Kit    白介素22受体α2(IL2Rα2)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗体    IL2R ELISA Kit    白介素22受体(IL2R)ELISA试剂盒
细胞纤毛内转运同源蛋白46抗体    IL22 ELISA Kit    白介素22(IL22)ELISA试剂盒
白细胞介素-10受体a抗体    IL21R ELISA Kit    白介素21受体(IL21R)ELISA试剂盒
白细胞介素-13受体a1抗体    IL21 ELISA Kit    白介素21(IL21)ELISA试剂盒
免疫相关鸟苷三磷酸酶基因抗体    IL20 ELISA Kit    白介素20(IL20)ELISA试剂盒
白细胞介素-13受体a2抗体    IL2 ELISA Kit    白介素2(IL2)ELISA试剂盒
嗜酸粒细胞趋化蛋白CCL1抗体    IRAK4 ELISA Kit    白介素1受体关联激酶4(IRAK4)ELISA试剂盒
磷酸化胰岛素样生长因子1受体抗体    IRAK3 ELISA Kit    白介素1受体关联激酶3(IRAK3)ELISA试剂盒
胰岛素降解酶抗体    IRAK2 ELISA Kit    白介素1受体关联激酶2(IRAK2)ELISA试剂盒
白介素12抗体    IRAK1 ELISA Kit    白介素1受体关联激酶1(IRAK1)ELISA试剂盒
白介素4抗体    IL1RAPL2 ELISA Kit    白介素1受体辅助蛋白样蛋白2(IL1RAPL2)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子结合蛋白9抗体    IL1RAP ELISA Kit    白介素1受体辅助蛋白(IL1RAP)ELISA试剂盒
干扰素-gamma受体2抗体    IL1R2 ELISA Kit    白介素1受体Ⅱ(IL1R2)ELISA试剂盒
白细胞介素27受体抗体    IL1R1 ELISA Kit    白介素1受体Ⅰ(IL1R1)ELISA试剂盒
白介素-1受体拮抗剂抗体    IL1F9 ELISA Kit    白介素1家族成员9(IL1F9)ELISA试剂盒
KB抑制蛋白激酶γ抗体    IL1θ ELISA Kit    白介素1θ(IL1θ)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体    IL1η ELISA Kit    白介素1η(IL1η)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体    IL1ζ ELISA Kit    白介素1ζ(IL1ζ)ELISA试剂盒
转基因元件小麦热激蛋白基因终止子PCR试剂盒磷酸化KB抑制蛋白激酶α/IKK α 抗体    IL1ε ELISA Kit    白介素1ε(IL1ε)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体    FIL1δ ELISA Kit    白介素1δ(FIL1δ)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体    IL1β ELISA Kit    白介素1β(IL1β)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗体    IL1α ELISA Kit    白介素1α(IL1α)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶γ抗体    IL19 ELISA Kit    白介素19(IL19)ELISA试剂盒
磷酸化KB抑制蛋白激酶β抗体    IL18RAP ELISA Kit    白介素18受体辅助蛋白(IL18RAP)ELISA试剂盒
干扰素alpha诱导蛋白6抗体    IL18R1 ELISA Kit    白介素18受体1(IL18R1)ELISA试剂盒
白介素-17E抗体    IL18BP ELISA Kit    白介素18结合蛋白(IL18BP)ELISA试剂盒
磷酸化胰岛素受体底物p-IRS-1/2抗体    IL18 ELISA Kit    白介素18(IL18)ELISA试剂盒
tRNA异亮氨酸连接酶抗体    IL17RA ELISA Kit    白介素17受体A(IL17RA)ELISA试剂盒
整合素α2抗体    IL17F ELISA Kit    白介素17F(IL17F)ELISA试剂盒
干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白3抗体    IL17D ELISA Kit    白介素17D(IL17D)ELISA试剂盒
干扰素诱导的三角形四肽重复蛋白5抗体    IL17C ELISA Kit    白介素17C(IL17C)ELISA试剂盒
干扰素诱导跨膜蛋白2抗体    IL17 ELISA Kit    白介素17(IL17)ELISA试剂盒轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5μl，37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。

实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。