转基因元件泛素基因启动子染料法qPCR试剂盒

转基因元件泛素基因启动子染料法qPCR试剂盒产品特点:
灵敏度高：可检测个位拷贝数的基因
特异性高：有效避免非特异性扩增的出现
稳定性高：复孔间差异小，实验结果重复性强
扩增性能优：扩增效率高，荧光信号强
样品RNA的抽提：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇（75%乙醇用DEPCH2O配制），清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
2 RNA质量检测
1）紫外吸收法测定
先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释（1:100）后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。
① 浓度测定
A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为：A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
样品cDNA合成:
①反应体系
序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
2  上游引物  0.2μl
3  下游引物  0.2μl
4 dNTP  0.1μl
5  逆转录酶MMLV  0.5μl
6  DEPC水  5μl
7  RNA模版  2μl
8  总体积  10μl
试剂盒
抑制素A/Inhibin βA抗体    αCTx ELISA Kit    α-骨胶原交联(αCTx)ELISA试剂盒
胰岛素受体底物-3抗体    SPTAN1 ELISA Kit    α-胞衬蛋白(SPTAN1)ELISA试剂盒
胰岛素受体底物p53蛋白抗体    AFM ELISA Kit    α白蛋白(AFM)ELISA试剂盒
胰岛素受体底物-1抗体    α2PI ELISA Kit    α2-纤溶酶抑制因子(α2PI)ELISA试剂盒
胰岛素受体底物-2抗体    α2ML1 ELISA Kit    α2-微球蛋白样蛋白1(α2ML1)ELISA试剂盒
胰岛素受体底物-4抗体    α2M ELISA Kit    α2-巨球蛋白(α2M)ELISA试剂盒
白介素14抗体    αHSG ELISA Kit    α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA试剂盒
肿瘤细胞凋亡ASPP家族的另一个成员抗体    α1M ELISA Kit    α1-微球蛋白(α1M)ELISA试剂盒
Caspase激活的脱氧核糖核酸酶抑制剂抗体    α1AGP ELISA Kit    α1-酸性糖蛋白(α1AGP)ELISA试剂盒
胰岛素受体α抗体    α1ACT ELISA Kit    α1-抗胰糜蛋白酶(α1ACT)ELISA试剂盒
整合素α3β1抗体    α1AT ELISA Kit    α1-抗胰蛋白酶(α1AT)ELISA试剂盒
整合素β7抗体    α1BG ELISA Kit    α1-B-糖蛋白(α1BG)ELISA试剂盒
支架蛋白抗体    ZIN ELISA Kit    Zinedin蛋白(ZIN)ELISA试剂盒
非洲爪蟾IGC抗体    EZH2 ELISA Kit    Zeste同源物增强子2(EZH2)ELISA试剂盒
干扰素诱导跨膜蛋白1抗体    EZH1 ELISA Kit    Zeste同源物增强子1(EZH1)ELISA试剂盒
干扰素β抗体    SUZ12 ELISA Kit    Zeste12同源物1抑制因子2(SUZ12)ELISA试剂盒
γ-干扰素/γ-IFN单克隆抗体    Tβ4Y ELISA Kit    Y-染色体胸腺素β4(Tβ4Y)ELISA试剂盒
干扰素-γ/IFN-γ抗体    PYY3 ELISA Kit    YY肽3(PYY3)ELISA试剂盒
干扰素-γ/IFN-γ抗体    PYY2 ELISA Kit    YY肽2(PYY2)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子I受体抗体    PYY ELISA Kit    YY肽(PYY)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子1受体抗体    YY1 ELISA Kit    YY1转录因子(YY1)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子结合蛋白2抗体    YBEY ELISA Kit    YbeY金属肽酶(YBEY)ELISA试剂盒
转基因元件泛素基因启动子染料法qPCR试剂盒胰岛素样生长因子结合蛋白5抗体    Xtrp3 ELISA Kit    X-转运蛋白3(Xtrp3)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子1抗体    Xtrp2 ELISA Kit    X-转运蛋白2(Xtrp2)ELISA试剂盒
胰岛素样生长因子-II抗体    XRCC6 ELISA Kit    X-射线修复交叉互补蛋白6(XRCC6)ELISA试剂盒
白细胞介素10抗体    XRCC5 ELISA Kit    X-射线修复交叉互补蛋白5(XRCC5)ELISA试剂盒
白介素13抗体    XPNPEP3 ELISA Kit    X-脯氨酰氨肽酶3(XPNPEP3)ELISA试剂盒
白介素-17抗体    XIAP ELISA Kit    X-连锁凋亡蛋白抑制因子(XIAP)ELISA试剂盒
白细胞介素-18/干扰素γ诱导因子抗体    XBP1 ELISA Kit    X-框结合蛋白1(XBP1)ELISA试剂盒
白介素1受体相关蛋白样1前体蛋白抗体    WFS1 ELISA Kit    Wolfram综合征蛋白1(WFS1)ELISA试剂盒
白介素1β/IL-1β抗体    WIF1 ELISA Kit    WNT抑制因子1(WIF1)ELISA试剂盒
白介素2抗体    WISP2 ELISA Kit    WNT1诱导信号通道蛋白2(WISP2)ELISA试剂盒
白细胞介素-2单克隆抗体    WISP1 ELISA Kit    WNT1诱导信号通道蛋白1(WISP1)ELISA试剂盒
白介素-23抗体    WHRN ELISA Kit    Whirlin蛋白(WHRN)ELISA试剂盒
白介素4抗体    WFDC5 ELISA Kit    WAP四二硫化物核心域蛋白5(WFDC5)ELISA试剂盒
白介素6    LYN ELISA Kit    V-Yes-1Yamaguchi肉瘤病毒相关癌基因同源物(LYN)ELISA试剂盒
白介素6抗体    RELB ELISA Kit    V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物B(RELB)ELISA试剂盒
白介素6抗体    RELA ELISA Kit    V-Rel网状内皮增生病毒癌基因同源物A(RELA)ELISA试剂盒
抑制素A/Inhibin α抗体    MYC ELISA Kit    V-Myc骨髓细胞瘤病毒癌基因同源物(MYC)ELISA试剂盒
鸡传染性喉气管炎病毒糖蛋白E抗体    MYB ELISA Kit    V-Myb髓细胞组织增生病毒癌基因同源物(MYB)ELISA试剂盒
小肠型脂肪酸结合蛋白抗体    MAF ELISA Kit    V-Maf肌肉腱膜纤维肉瘤癌基因同源物(MAF)ELISA试剂盒
白细胞介素-7受体a抗体    KRAS ELISA Kit    V-Ki-Ras2Kirsten大鼠肉瘤病毒癌基因同源物(KRAS)ELISA试剂盒

干扰素调节因子6抗体    Treslin ELISA Kit    TOPBP1相互作用复制刺激蛋白轻弹管底将溶液混合，6000rpm短暂离心。
②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟，取出后立即冰水浴至管内外温度一致，然后加逆转录酶0.5μl，37℃水浴60分钟。
③取出后立即95℃干浴3分钟，得到逆转录终溶液即为cDNA溶液，保存于-80℃待用。

实验步骤：
①取冻存已裂解的细胞，室温放置5分钟使其完全溶解。
②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang，盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后，15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相，中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA，混匀后15到30℃孵育10分钟后，于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀。混匀后，4℃下7000rpm离心5分钟。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时，先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次，使其完全溶解，获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后，读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值，测定RNA溶液 浓度和纯度。