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转基因元件tOCS LAMP试剂盒

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  • 上海一研
  • 进口、国产
  • EY-P964630
  • 2025年07月13日
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      100

    • 供应商

      上海一研

    • 规格

      50T

    转基因元件tOCS LAMP试剂盒产品特点:
    灵敏度高:可检测个位拷贝数的基因
    特异性高:有效避免非特异性扩增的出现
    稳定性高:复孔间差异小,实验结果重复性强
    扩增性能优:扩增效率高,荧光信号强
    样品RNA的抽提:
    ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
    ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。 ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。
    2 RNA质量检测
    1)紫外吸收法测定
    先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。
    ① 浓度测定
    A260下读值为1表示40 ?g RNA/ml。样品RNA浓度(?g/ml)计算公式为:A260 ×稀释倍数× 40 ?g/ml。
    样品cDNA合成:
    ①反应体系
    序号  反应物  剂量 1  逆转录buffer  2μl
    2  上游引物  0.2μl
    3  下游引物  0.2μl
    4 dNTP  0.1μl
    5  逆转录酶MMLV  0.5μl
    6  DEPC水  5μl
    7  RNA模版  2μl
    8  总体积  10μl
    轻弹管底将溶液混合,6000rpm短暂离心。
    ②混合液在加入逆转录酶MMLV 之前先70℃干浴3分钟,取出后立即冰水浴至管内外温度一致,然后加逆转录酶0.5μl,37℃水浴60分钟。
    ③取出后立即95℃干浴3分钟,得到逆转录终溶液即为cDNA溶液,保存于-80℃待用。
    产品细节图片1
    活化蛋白激酶B抗体    PEF1 ELISA Kit    Peflin蛋白(PEF1)ELISA试剂盒
    磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗体    PDLIM1 ELISA Kit    PDZ和LIM域蛋白1(PDLIM1)ELISA试剂盒
    凋亡细胞清除受体抗体    PALM3 ELISA Kit    Paralemmin3蛋白(PALM3)ELISA试剂盒
    磷酸化原癌基因c-Jun抗体    PALM2 ELISA Kit    Paralemmin2蛋白(PALM2)ELISA试剂盒
    转基因元件tOCS LAMP试剂盒Notch配体Jagged 2蛋白抗体    PALM ELISA Kit    Paralemmin蛋白(PALM)ELISA试剂盒
    组蛋白去甲基化Jarid1C抗体    PAPLN ELISA Kit    Papilin蛋白(PAPLN)ELISA试剂盒
    组蛋白去甲基转移酶JMJD1B抗体    PANX3 ELISA Kit    Pannexin3蛋白(PANX3)ELISA试剂盒
    亲联蛋白2抗体    PANX2 ELISA Kit    Pannexin2蛋白(PANX2)ELISA试剂盒
    驱动蛋白家族蛋白13B抗体    PANX1 ELISA Kit    Pannexin1蛋白(PANX1)ELISA试剂盒
    驱动蛋白家族蛋白7抗体    PALMD ELISA Kit    Palmdelphin蛋白(PALMD)ELISA试剂盒
    CREB结合蛋白抗体    PALD ELISA Kit    Paladin蛋白(PALD)ELISA试剂盒
    脑蛋白9抗体    PUMA ELISA Kit    p53上调凋亡调节因子(PUMA)ELISA试剂盒
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    电压门控性钾通道蛋白亚基KV6.3抗体    NAGK ELISA Kit    N-乙酰葡糖胺激酶(NAGK)ELISA试剂盒实验步骤:
    ①取冻存已裂解的细胞,室温放置5分钟使其完全溶解。
    ②两相分离 每1ml的TRIZOL试剂裂解的样品中加入0.2ml的lvfang,盖紧管盖。手动剧烈振荡管体15秒后,15到30℃孵育2到3分钟。4℃下12000rpm离心15分钟。离心后混合液体将分为下层的红色酚lvfang相,中间层以及无色水相上层。RNA全部被分配于水相中。水相上层的体积大约是匀浆时加入的TRIZOL试剂的60%。
    ③RNA沉淀 将水相上层转移到一干净无RNA酶的离心管中。加等体积异丙醇混合以沉淀其中的RNA,混匀后15到30℃孵育10分钟后,于4℃下12000rpm 离心10分钟。此时离心前不可见的RNA沉淀将在管底部和侧壁上形成胶状沉淀块。
    ④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL试剂裂解的样品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混匀后,4℃下7000rpm离心5分钟。
    ⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室温空气中干燥5-10分钟。 ⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA时,先加入无RNA酶的水40μl用枪反复吹打几次,使其完全溶解,获得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法测定先用稀释用的TE溶液将分光光度计调零。然后取少量RNA溶液用TE稀释(1:100)后,读取其在分光光度计260nm和280nm处的吸收值,测定RNA溶液 浓度和纯度。

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