- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-768600
- 中国
- 2025年07月15日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium（NHPB）
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium（NHPB）
肝胰腺坏死性细菌（Necrotizing Hepatopancreatitis Bacterium）会引起坏死性肝胰腺炎，患病之后可能会表现为上腹部出现剧烈的疼痛，并且患病部位摸起来是比较硬的，还会伴随有麻痹性的一些感觉，严重的时候患者甚至会出现消化道出血的情况，给人体健康造成较大损害，因此检测肝胰腺坏死性细菌具有重要意义。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增肝胰腺坏死性细菌。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 90805 | 1 mL（亮黄盖 |
| 超纯水 | 100935 | 1 mL（蓝色） |
| 肝胰腺坏死性细菌(虾肝胰腺坏死性细菌)PCR 引物混合液 | 13-68600yw | 100 μL（白盖） |
| 肝胰腺坏死性细菌(虾肝胰腺坏死性细菌)PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 13-68600pc | 100 μL（黄盖 |
| 天净沙DNA释放剂试用装 | 130982 | 50次（试用装 |
| 使用手册 | 13-68600sc | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1.如果有N个样品，必须设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10μL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。
2.用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数细菌DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的细菌DNAout或柱式细菌DNAout。本试剂盒免费赠送50次免DNA提取的天净沙DNA释放剂，本产品的裂解液可以直接作为PCR模板，省略了DNA提取步骤。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 肝胰腺坏死性细菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| 样品制备阴性对照 | - | 18 μL | - |
| 样品制备阴性对照 | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
94℃ | 20sec |
| 58℃ | 20sec | |
| 72℃ | 30 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取10-20 μL PCR产物。电泳检测PCR产物。本产品提供的PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加loading buffer。预期的PCR产物长度为208bp。阳性对照必须有此条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。对没有扩增产物的样品，可以稀释10倍后重复PCR扩增以排除PCR抑制剂的感染。
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