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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
大量
- 英文名:
Adenovirus(AV)
- 保质期:
一年
- 供应商:
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件:
-20℃保存
- 规格:
50次
Adenovirus(AV)
本试剂盒采用聚合酶链式反应(PCR)技术检测,可用于检测各种待检标本(如血液、粪便、食物、生物材料等)中所感染的特定细菌或病毒的某一特定基因,进而确定该细菌或病毒的感染/污染状态。试剂盒中所含引物能特异性扩增该细菌或者病毒的保守区域,不会交叉扩增细胞基因组。与传统的选择性培养基培养检测方法和免疫血清学检测方法相比较,本方法更为快速,特异性更高。
它具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化,专一性强,只扩增腺病毒B型序列,与其他没有交叉反应。
3. 提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次,但只能用于科研。
规格及成分:
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL(红盖) |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL(亮黄色) |
| 腺病毒B型PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL(白盖) |
| 腺病毒B型PCR 阳性对照(1×10E8 拷贝/μL) | 试剂四 | 50 μL(黄盖) |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存:
低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。阳性对照需要单独放置,不要污染其他试剂。
自备试剂:
样本DNA。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA,本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品,则需要做 N+2 个提取,包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是腺病毒B型PCR 阳性对照的1000 倍稀释液,样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应(40μL 体系)
3. 对 N+2 个样品,在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照,故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分:
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 腺病毒B型PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照(水) | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照(腺病毒B型PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液) | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应:
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 (35 个循环) |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样,不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现,阴性对照必须无任何扩增,否则实验无效。 对没有扩增产物的样品,可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验)小鼠模型,利用腺病毒相关病毒设计了两套基因传递载体,一种载体携带锌指核酸酶实现基因组剪接,另一种携带正常的F9基因(F9基因突变引发B型血友病)。这样将锌指核酸酶送入到患有乙型血友病的活体实验鼠的肝脏细胞中,利用第一个载体精确地剪除了细胞DNA中基因序列上发生变异的部分,在利用第二个载体将一段正确的基因序列送入细胞中,细胞在修复DNA链条的同时也就补贴好了正确的基因序列。 研究显示转基因实验鼠的血液可在44秒内快速自行凝结,体内相应的凝血物质可恢复到正常量的3-7%,经过八个月的观察,其间
(prohead)、原壳(procapsid)或病毒样颗粒(Virus-like particle, VLP)[1]。噬菌体衣壳装配首先由12个孔道蛋白 gpI聚合成玫瑰形的十二聚体顶角,此顶角为病毒核酸包装和感染细菌过程中核酸出入的通道[2]。在疱疹病毒感染的细胞内有三种衣壳:A型衣壳为一空壳,不含病毒核酸及内部结构;B型衣壳又称中间型衣壳,不含病毒核酸,但在病毒外壳内还有一蛋白 质层;C型颗粒为完整的病毒颗粒。B型衣壳是A、C型的前体,B型衣壳的蛋白 质层为骨架蛋白 ,由VP21、VP22a组成
目前已经开发的或正处于实验阶段的疫苗 (一)病毒类疫苗 1.减毒活疫苗 HIV减毒活疫苗、甲型肝炎疫苗、流感疫苗、牛痘疫苗、脊髓灰质炎疫苗、麻疹疫苗、腺病毒疫苗、黄热病疫苗、风疹疫苗、腮腺炎疫苗、水痘疫苗、轮状病毒疫苗、乙型脑炎疫苗。 2.全病毒灭活疫苗 流感疫苗、狂犬病疫苗、脊髓灰质炎疫苗、甲型肝炎疫苗、流行性出血热疫苗、斑疹伤寒疫苗。亚单位疫苗:乙型肝炎疫苗、流感嗜血杆菌疫苗。
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