- ￥2580
- 伊塔生物
- 国产/进口
- YT800864
- 2025年07月09日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保质期：
24609
- 保存条件：
133211
- 英文名：
lewis/luc
- CAS号：
1-1-1123
- 库存：
33
- 供应商：
北京伊塔生物科技有限公司
- 规格：
T25
小鼠肺癌细胞系-荧光 lewis/luc细胞，小鼠肺癌细胞系-荧光 lewis/luc细胞，小鼠肺癌细胞系-荧光 lewis/luc细胞 货号：YT800864 英文名称：lewis/luc，品牌：伊塔生物，规格：T25，形态特性：A-5，生长特性：贴壁生长 ，特征特性：A-5，培养条件：DMEM+10%FBS，传代方法： 1:2传代，冻存条件:无血清细胞冻存液,STR:已通过STR鉴定
| 细胞名称 | 小鼠肺癌细胞-荧光；lewis/luc （种属鉴定） |
|---|---|
| 别名 | lewis/luc |
| 货号 | YT800864 |
| 规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
| 形态特征 | |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 完全培养基 | |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2,5% 温度：37℃ |
| 传代方法 | 1:2传代 |
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文献和实验Generation of oligomers of subunit vaccine candidate glycoprotein D of Herpes Simplex Virus-756 expressed in fusion with IgM Fc domain(s) in Escherichia
【求助】请问将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中，建立稳定的细胞系，用哪种转染方法比较好？中间有什么细节是值得注意的
lsdcfhyj 请教前辈，将含荧光素酶报告基因的质粒转染到真核细胞中，建立稳定的细胞系，用哪种转染方法比较好？中间有什么细节是值得注意的 chenjing198345 如果lab经费充裕的话可以用试剂盒包装慢病毒，然后感染真核细胞，完全按照protocol做就行，没啥特别的，sbi的kit不错。如果经费有限，一般是用磷酸钙转染法，这种方法在《分子克隆》里面有介绍，缓冲液的ph值很关键。 lsdcfhyj
待检测基因-Luc/Rluc的重组质粒；2、细胞系选择: 根据实验需要选择细胞株，通常选择转染效率较高的293T细胞或原代细胞等；3、共转染: 将带有Luc/Rluc标记的报告基因和目的基因进行共转染，设置不同的检测时间点，一般为24h/48h；4、外界干预: 转染后，可进行物理/化学/病毒等的相应刺激；5、细胞处理: 采用进口/国产双荧光素酶检测试剂盒依照protocol操作；6、荧光检测: 使用GENios Pro 酶标仪或具有类似检测功能的设备进行荧光强度检测。三、荧光素酶报告基因的优点
剂量不足 对病毒进行重新定量； 提高病毒滴度：浓缩病毒液，使用更高效的病毒包装系统； 优化感染复数（MOI）：通过逐步增加 MOI 值来测试最佳的感染量 目标细胞对慢病毒的敏感性低 慢病毒通常在其表面有 VSV 糖蛋白，并利用它与细胞表面的 LDL 受体结合。如果目标细胞没有表达大量的 LDL 受体（如某些物种的干细胞系表面的 LDL 受体表达水平低），那么无论你使用多高的 MOI，都不会获得良好的转导效率。用流式细胞术、免疫荧光等方法确定靶细胞表面 LDL 受体的表达水平，选择 LDL 受体
