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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- CAS号:
1332
- 保质期:
2年
- 保存条件:
RT
- 英文名:
人皮肤成纤维细胞系;BJ细胞/STR鉴定
- 库存:
99
- 供应商:
北京伊塔生物科技有限公司
- 规格:
T25
人皮肤成纤维细胞系;BJ细胞/STR鉴定YT800641人皮肤成纤维细胞系;BJ细胞/STR鉴定,单价:2000,规格:T25,成纤维细胞样,贴壁生长
| 细胞名称 | 人皮肤成纤维细胞;BJ (STR) |
|---|---|
| 别名 | BJ |
| 货号 | YT800641 |
| 规格 | 1×10⁶cells/T25培养瓶 |
| 形态特征 | 成纤维细胞样 |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 完全培养基 | DMEM+10%FBS |
| 冻存条件 | 无血清细胞冻存液 |
| 培养条件 | 气相:空气,95%;CO2,5% 温度:37℃ |
| 传代方法 | 1:2传代 |

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文献和实验人皮肤成纤维细胞系;BJ细胞/STR鉴定
毒。 高效感染 在人原代成纤维细胞(BJ细胞)中,用Adeno-X表达系统高水平表达β-半乳糖苷酶。未纯化的重组腺病毒含有来自于HEK 293细胞的lacZ基因,用于直接感染BJ细胞。将细胞培养在常规生长培养基上,48小时后染色。结果显示,被感染的细胞高水平地表达β-半乳糖苷酶。若使用纯化腺病毒(氯化铯离心可产生1012pfu/ml的效价),可获得更高的蛋白质表达。这不但对于更高水平的表达有用,且对于需要用更高效价的腺病毒进行感染的细胞类型也有意义。 容易筛选 体外
大肠杆菌DH5α并筛选重组子。最后,用重组腺病毒DNA转染HEK 293病毒包装细胞系。由于从Adeno-X病毒DNA中删除了E1基因,使其无法感染细胞,这一步需要用HEK 293包装细胞提供反式的E1蛋白,即可得到含有目的基因、有感染能力的重组腺病毒。高效感染在人原代成纤维细胞(BJ细胞)中,用Adeno-X表达系统高水平表达β-半乳糖苷酶。未纯化的重组腺病毒含有来自于HEK 293细胞的lacZ基因,用于直接感染BJ细胞。将细胞培养在常规生长培养基上,48小时后染色。结果显示,被感染的细胞
克隆细胞直到能被冷冻或被鉴定,若病毒产生克隆被鉴定,10%~15%DMSO保护剂液氮冻存细胞。即产生病毒细胞系建立。 2、病毒滴度鉴定 在分离产生病毒的克隆后,需进行病毒滴度的测定,常用的方法是用病毒感染目的细胞,可根据载体RNA或蛋白的出现粗略定量分析。 2.1准备工作: (1)病毒贮存液(步骤5所得) (2)目的细胞系(NIH3T3成纤维细胞) (3)G418或其它选择性药物 2.2操作步骤: (1)目的细胞系NIH3T3细胞在感染前一天按1:10至1:20接种6cm培养









