- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-764310
- 中国
- 2025年07月14日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Listeria ivanovii
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
伊氏李斯特菌PCR试剂盒
Listeria ivanovii
产品简介：Listeria ivanovii
伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii)是引起人兽共患伊氏李斯特菌病的病原菌，该菌感染宿主中枢神经系统是导致高死亡率的主要原因，较容易感染的动物是绵羊，所以该菌又被称为绵羊伊氏李斯特菌，感染该病菌会给养殖业带来较大的经济损失，因此伊氏李斯特菌的快速准确鉴定对该病的预防和检疫有着重要作用。本试剂盒根据荧光定量PCR原理开发，它具有下列特点：
1.即开即用，用户只需要提供细菌DNA模板。
2.引物经过精心优化，专一性强，只扩增伊氏李斯特菌。
3.提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4.PCR mix中含上样染料，PCR后可以直接上样电泳。
5.本试剂盒足够做40μL体系的PCR 50次。
6.本产品只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 伊氏李斯特菌PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 伊氏李斯特菌PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是伊氏李斯特菌PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 伊氏李斯特菌PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（伊氏李斯特菌PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验相关实验
的胞内寄生的革兰阳性短杆菌，共分为2个群，7个种。第一群包括产单核细胞李斯特菌、伊氏李斯特菌、无害李斯特菌(又名英洛克李斯特菌) 、韦氏李斯特菌及西尔李斯特菌；第二群为较少见的格氏李斯特菌和莫氏李斯特菌。其中产单核细胞李斯特菌和伊氏李斯特菌具有致病性，且产单核细胞李斯特菌是惟一能引起人类疾病的，是一种人兽共患病的病原菌，能引起人、畜的李斯特菌病，感染后主要表现为败血症、脑膜炎、流产和单核细胞增多。这种病菌在自然界广泛存在，食品中存在的产单核细胞李斯特菌对人类的安全具有危险，世界卫生组织(WHO)指出
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