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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 检测范围:
/
- 检测方法:
酶联免疫吸附试验法
- 应用:
检测
- 适应物种:
人
- 标记物:
HRP
- 样本:
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包人血管生成素1(ANG-1)ELISA试剂盒抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
试剂盒样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000转离心10分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作注意事项
- 试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
- 浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。





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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data
期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
人钙粒蛋白C(Calgranulin C)ELISA试剂盒 说明书
上海西唐生物科技有限公司 021-55229872, 65333639 www.westang.com 人钙粒蛋白C ( Calgranulin C )ELISA 试剂盒 ( 用于血清、血浆、细胞培养上清液和生物体液内 ) 原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA 法。用抗人 Calgranulin C 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Calgranulin C
的特异性,其亲和力较抗原抗体反应大得多,两者一经结合就极为稳定。由于一个亲和素可与 4个生物素分子结合,因此如把ABS与ELISA法可分为酶标记亲和素-生物素(LAB)法和桥联亲和素-生物素(ABC)法两种类型。两者均以生物素标记的抗体(或抗原)代替原ELISA系统中的酶标抗体(抗原)。在LAB 中,固相生物素先与不标记的亲和素反应,然后再加酶标记的生物素以进一步提高敏感度。在早期,亲和素从蛋清中提取,这种卵亲和素为碱性糖蛋白,与聚苯乙烯载体的吸附性很强,用于ELISA中可使本底增高。从链霉菌中
物质浓度。 两点终点法常应用于双试剂的测定项目中,多数第一试剂通常只含缓冲液等成分,它与样本一般不起特异性反应;因此在第二试剂加入前,选择一个测光点作为第一读数点,此时的吸光度相当于样品空白。加入第二试剂后待测物质起反应,并经过一定时间反应到达平衡点,此时选择第二个读数点,两读数点吸光度之差用于计算待测物质浓度。 两点法能有效消除样品溶血、黄疸、脂浊等造成的光吸收干扰。如:酶法测定葡萄糖、总胆固醇、甘油三酯、尿酸、肌酐,以及化学法测定总蛋白、总胆红素、直接胆红素、钙、磷、镁、铁等;并且都能在加入
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