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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海富雨
- 检测范围:
/
- 检测方法:
酶联免疫吸附试验法
- 应用:
检测
- 适应物种:
人
- 标记物:
HRP
- 样本:
血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本
人游离蛋白S(FP-S)酶联免疫吸附测定试剂盒
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
使用说明书
本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织匀浆及相关液体样本中人游离蛋白S(FP-S)的含量。
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
备注:
1.(96T/48T)打开包装后请及时检查所有物品是否齐全。
2.标准品浓度依次为:24、12、6、3、1.5、0.75 μg/mL
3.经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。
检测前准备工作:
1.请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2.从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3.20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
试剂盒组成:
实验原理:
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人游离蛋白S(FP-S)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的人游离蛋白S(FP-S)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
实验所需自备试验器材:
1.酶标仪(450nm)
2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3.37℃恒温箱
4.蒸馏水或去离子水
操作步骤:
实验结果计算:
绘制标准曲线:在Excel工作表中,以标准品浓度作横坐标,对应OD值作纵坐标,绘制出标准品线性回归曲线,按曲线方程计算各样本浓度值。
(此图仅供参考)
试剂盒性能:
1.检测范围:0.75 μg/mL – 24 μg/mL。
2.灵敏度:低检测浓度小于0.1 μg/mL。
3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4.重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。
技术小提示:
1.当混合或重溶蛋白溶液时,尽量避免起沫。
2.为了避免交叉感染,配置不同浓度标准品、上样、加不同试剂都需要更换枪头。另外不同试剂请分别使用不同的移液槽。
3.每次孵育时,请正确使用封板胶可保证结果的准确性。
4.混合后的显色底物在上板前应为无色,请避光保存;假如微孔板后,将由物色变成不同深度的蓝色。
5.终止液上板顺序应同显色底物上板顺序一致;加入终止液后,孔内颜色由蓝变黄;若孔内有绿色,则表明孔内液体未混匀;请充分混合。
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文献和实验Analysis of the effect of PECAM1 on the migration and invasion of gastrointesti- nal stromal tumor cells based on single-cell transcriptome sequencing data
期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
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