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人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒

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  • FY-03319H2
  • 2026年05月25日
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    • 库存

      100

    • 供应商

      上海富雨

    • 检测范围

      /

    • 检测方法

      酶联免疫吸附试验法

    • 应用

      检测

    • 适应物种

    • 标记物

      HRP

    • 样本

      血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本

    本规程仅用于科研实验,不可用于临床诊断及人体诊疗;适用试剂盒:人肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)ELISA试剂盒(48T/96T可拆条)

    一、试剂盒核心技术参数

    • 检测原理:双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验,450nm波长测定吸光度(OD值)
    • 检测样本:人血清、血浆、组织匀浆、细胞上清液
    • 检测范围:6.25–200 U/mL
    • 检测灵敏度:≤1.0 U/mL
    • 重复性:板内变异系数CV<8%,板间变异系数CV<10%
    • 特异性:与CEA、AFP、铁蛋白等常见指标无明显交叉反应
    • 保存条件:2–8℃避光保存,有效期6个月,严禁试剂反复冻融
    • 实验温度:全程室温20–25℃,温育恒定37℃

    二、试剂盒组分(96T通用)

    预包被酶标板、梯度标准品(6浓度)、样本稀释液、HRP检测抗体、20×浓缩洗涤液、底物A/B液、终止液、封板膜、说明书

    三、样本处理标准流程

    1. 血清样本:无菌试管采血,室温静置凝固10–20min,3000rpm离心10min,吸取上层清亮上清备用。
    2. 血浆样本:EDTA、柠檬酸钠、肝素均可抗凝,采血后混匀,3000rpm离心10min,取上清备用。
    3. 组织匀浆样本:组织剪碎后加入生理盐水研磨制备匀浆,3000rpm离心10min,取上清待测。
    4. 样本保存:短期2–8℃可存放24h;长期需分装后-20℃冻存,禁止反复冻融

    四、试剂预处理

    1. 实验前所有试剂盒试剂、酶标板条取出,室温平衡20min;未使用板条密封避光保存。
    2. 20×浓缩洗涤液用纯水稀释为1×工作液,现配现用。

    五、标准实验操作步骤

    1. 加样:设置空白孔、标准孔、待测样本孔。标准孔每孔加梯度标准品50μL,样本孔加待测样本50μL,空白孔不加任何液体。
    2. 温育:所有检测孔每孔加入HRP检测抗体100μL,贴好封板膜,37℃恒温孵育60min。
    3. 洗板:弃去孔内液体,每孔加入1×洗涤液350μL,静置1min后甩干拍干,重复洗涤5次。
    4. 显色:每孔依次加入底物A液、底物B液各50μL,轻柔混匀,37℃避光显色15min。
    5. 终止:每孔加入终止液50μL,轻柔混匀终止反应,溶液由蓝色变为黄色。
    6. 读数

    六、结果计算方法

    1. 以标准品浓度为横坐标,对应OD值为纵坐标,绘制标准曲线,计算回归方程。
    2. 将样本OD值代入方程,计算样本TSGF实际浓度。
    3. 科研参考阈值:0–64 U/mL为正常参考范围,>64 U/mL提示异常(仅科研参考,无临床诊断效力)。

    七、关键质控与注意事项

    • 全程使用一次性无菌吸头,避免样本、试剂交叉污染,影响实验结果。
    • 洗板务必充分彻底,残留洗液会导致背景偏高、结果误差大。
    • 底物液需避光保存、避光显色,显色时间严格把控,避免过染或显色不足。
    • 温育、显色温度、时间需统一标准,保证实验重复性。
    • 所有操作严格遵循科研规范,本实验结果仅用于学术研究,严禁用于临床诊断。
    • 试剂出现浑浊、沉淀、变色等异常情况,禁止使用。

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    图标文献和实验
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    期刊:MODERN ONCOLOGY,Aug.2023,VOL. 31,No. 16
    作者:HU Wu1,WEN Yiqiao2,QIN Jialan1,ZHAO Ying3,ZHANG Tianbiao1
    DOI:10.3969 /j.issn.1672-4992.2023.16.003
     

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