- ￥2490
- YBio/钰博生物
- YB13-71330
- 中国
- 2025年07月15日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Bartonella henselae PCR Kit
- 保质期：
一年
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 保存条件：
-20℃保存
- 规格：
50次
抓热）PCR 试剂盒
Bartonella henselae PCR Kit
猫抓病 (cat scratch disease) 主要由汉赛巴尔通体 (Bartonellahenselae) 感染引起的一种相对常见的人畜共患病，常由携带病原体的宠物，尤其是猫抓伤后导致患者引流区淋巴结区域性肿大。猫抓病的病理学改变虽然具有一定的特点，但无特异性，需与多种病变鉴别，因此对病变淋巴结进行病原学检测有助于确诊猫抓病。本产品是根据 PCR原理开发的汉氏巴尔通体检测试剂盒，它具有下列特点：
1. 即开即用，用户只需要提供 DNA 模板。
2. 引物经过精心优化，专一性强，只扩增汉氏巴尔通体，与其他病原没有交叉反应。
3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。
4. PCR mix 中含上样染料，PCR 后可以直接上样电泳。
5. 本试剂盒足够做 40μL 体系的 PCR 50 次，但只能用于科研。
规格及成分：
| 成 份 | 编号 | 十孔盒包装 |
| PCR MagicMix 3.0 | 试剂一 | 1 mL（红盖） |
| 超纯水 | 试剂二 | 1 mL（亮黄色） |
| 汉氏巴尔通体（汉塞巴尔通体、猫抓病、猫 抓热）PCR 引物混合液 | 试剂三 | 100 μL（白盖） |
| 汉氏巴尔通体（汉塞巴尔通体、猫抓病、猫 抓热）PCR 阳性对照（1×10E8 拷贝/μL） | 试剂四 | 50 μL（黄盖） |
| 使用手册 | ZY-99047 | 1份 |
运输及保存：
低温运输，-20℃保存，保存期限为一年。阳性对照需要单独放置，不要污染其他试剂。
自备试剂：
样本DNA。
使用方法：
一、样品 DNA 的制备
1. 用自选方法纯化 N+2 个样品的 DNA，本试剂盒跟市场上大多数核酸提取试剂盒兼容。
2. 如果有 N 个样品，则需要做 N+2 个提取，包括一个样品制备阳性对照和一个样品制备阴性对照。样品制备阳性对照是汉氏巴尔通体（汉塞巴尔通体、猫抓病、猫 抓热）PCR 阳性对照的1000 倍稀释液，样品制备阴性对照是直接用水。提取结束后最后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、设置 PCR 反应（40μL 体系）
3. 对 N+2 个样品，在 PCR 时需要增加一个 PCR 阳性对照和一个 PCR 阴性对照，故需要设置 N+4 个反应。在 N+4 个 PCR 管中分别加入下列成分：
成分 |
样品管 N+2 个 |
PCR 阴性对照 |
PCR 阳性对照 |
| PCR MagicMix 3.0 | 各 20 μL | 20 μL | 20 μL |
| 汉氏巴尔通体（汉塞巴尔通体、猫抓病、猫 抓热）PCR 引物混合液 | 各 2 μL | 2 μL | 2 μL |
| N+2 个样品 DNA 模板 | 各 18 μL | - | - |
| PCR 阴性对照（水） | - | 18 μL | - |
| PCR 阳性对照（汉氏巴尔通体（汉塞巴尔通体、猫抓病、猫 抓热）PCR 阳性对照的 1000 倍稀释液） | - |
- |
18 μL |
4. 按下表设置 PCR 反应：
| 过程 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 95℃ | 5 min |
PCR 反应 （35 个循环） |
95℃ | 15 sec |
| 57℃ | 15 sec | |
| 72℃ | 40 sec | |
| 最后延伸 | 72℃ | 10 min |
三、电泳检测
5. 取 10-20 μL PCR 产物。电泳检测 PCR 产物。本产品提供的 PCR Mix在扩增结束后可以直接上样，不需要另外再加 loading buffer。PCR 产物阳性对照必须有预期条带出现，阴性对照必须无任何扩增，否则实验无效。 对没有扩增产物的样品，可以稀释 10 倍后重复 PCR 扩增以排除 PCR 抑制剂的感染。
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文献和实验）从倍增基因获得，也可以来自人工合成的基因。通过PCR获得感兴趣的DNA的方法是：首先，分离含有感兴趣的DNA片段的mRNA的总RNA，并通过逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）将RNA逆转录成cDNA。根据公布的NCBI基因编码序列（CD）设计寡核苷酸引物，并在引物中加入指定的限制酶位点。然后，通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区，用凝胶提取试剂盒纯化后，将DNA片段插入克隆载体中。通过RT-PCR将RNA逆转录成cDNA通过PCR扩增感兴趣的DNA的编码区经验虽然从RT-PCR中获取DNA片段是常用
、非特异性扩增、连接效率低等弊端。TaKaRa新产品之Genome Walking Kit试剂盒是一种根据已知基因组DNA序列，高效获取侧翼未知序列的试剂盒。相对于其它传统方法，本试剂盒具有高效、简便、特异性高、灵敏度高、一次性获得的未知序列较长等特点。其主要原理是根据已知DNA序列，分别设计三条同向且退火温度较高的特异性引物（SP Primer），与试剂盒中提供的四种经过独特设计的退火温度较低的兼并引物，即AP1、AP2、AP3、AP4进行热不对称PCR反应。通常情况下，其中至少有一种兼并
度高、一次性获得的未知序列较长等特点。其主要原理是根据已知DNA序列，分别设计三条同向且退火温度较高的特异性引物（SP Primer），与试剂盒中提供的四种经过独特设计的退火温度较低的兼并引物，即AP1、AP2、AP3、AP4进行热不对称PCR反应。 通常情况下，其中至少有一种兼并引物可以与特异性引物之间利用退火温度的差异进行热不对称PCR反应，通过三次巢式PCR反应即可获取已知序列的侧翼序列。如果一次实验获取的长度不能满足实验要求时，还可以根据第一次步移获取的序列信息，继续进行侧翼
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