Thermo 4110-1000 Nalgene三角培养瓶1

细胞污染挽救

培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。 10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗. 11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养

小鼠脑神经瘤细胞概述及培养方法！

，1%。 2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为 70%-80%。 3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。 2、细胞处理： 1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。 2）细胞

正常人脐静脉原代内皮细胞培养

PBS （pH 7.4 ） 烧杯中↓烧杯放置到37℃ ， 15-20min 水浴 恒温消化，间隔 2-3min 摇动↓收集消化液，用培养基洗涤静脉3-4 次， 3ml/ 次，之后加入消化终止液（ PriCells ）反应↓离心，1000rmp,10min，弃去上清↓重悬，计数细胞↓接种 密度以5 × 10 5 个/ml↓培养37℃ ， 5%CO 2四、实验操作1、培养瓶预包被。试验前一天预包培养瓶，置于超静台吹干或 45℃ 烘箱烘干（切记保持无菌）， 4℃ 冰箱放置，备用。2、取材：正常