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- Sigma
- T4049
- Sigma
- 2025年11月09日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
大量
- 英文名：
Sigma 0.25%Trypsin-EDTA solution
- 供应商：
北京诺博莱德科技有限公司
- 规格：
100ml
SigmaT4049 0.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液100ml, 0.25%Trypsin-EDTA solution
Sigma的目标是通过与全球科学界的合作来解决生命科学中最棘手的问题通过这一点，我们的目标是加速让世界各地的人们获得更好的健康。Sigma为科学家和工程师提供**的实验材料、技术和服务。随着2015年默克密理博和西格玛奥尔德里奇的合并，我们现在拥有30万种产品的广泛组合和扩大的全球足迹。
Sigma致力于使研究和生物技术生产更简单、更快和更安全。
我们北京诺博莱德科技有限公司作为伯乐Sigma公司的经销商为客户提供，正规进口，保证原装正品，货期稳定，折扣好的服务标准
SigmaT40490.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液100ml, 0.25%Trypsin-EDTA solution,产品简介：
产品品牌：Sigma
产品名称：25%胰蛋白酶-EDTA 溶液
英文名称：0.25%Trypsin-EDTA solution
产品货号：T40490
产品规格：100ml
摩尔重量23.4 kDa
浓度：0.25%
应用细胞培养|哺乳动物：合适
猪细小病毒杂质，未检出（9 CFR）
pH值7.0-7.6
储存温度。−20摄氏度
SigmaT40490.25%胰蛋白酶-EDTA 溶液100ml, 0.25%Trypsin-EDTA solution,产品说明：
0.25%, sterile-filtered, BioReagent, suitable for cell culture, 2.5 g porcine trypsin and 0.2 g EDTA • 4Na per liter of Hanks′ Balanced Salt Solution with phenol red
0.25%，无菌过滤，生物制剂，适合细胞培养，每升含酚红的汉克斯平衡盐溶液含2.5 g猪胰蛋白酶和0.2 g EDTA•4Na
胰蛋白酶-EDTA溶液已用于：
在高浓度样品的相对细胞频率测定期间，将在补充了10%胎牛血清的RPMI 1640中培养的HT29人结直肠癌细胞进行分离。
胰蛋白酶消化瞬时转染的人胚肾tcA-201细胞系
在细胞培养期间酶促释放粘附于支架的小鼠成纤维细胞（L929细胞系），以评估几种改性处理对聚（L/D）丙交酯96/4非织造支架和纤维的影响。
该产品的常见用途在于将贴壁细胞从培养基表面移除。 将细胞从基底上分离所需的胰蛋白酶浓度主要依赖于细胞类型和培养基已使用的时间
Biochem/physiol Actions
胰蛋白酶可切割赖氨酸和精氨酸残基的C末端肽段。 如果酸性残基位于切割位点的任意一侧，则该反应的水解速度减慢，并且如果脯氨酸残基位于切割位点的羧基侧，则水解停止。 胰蛋白酶活性的最佳pH条件为7-9。 胰蛋白酶还可以切割氨基酸合成衍生物的酯和酰胺键。 将EDTA添加到胰蛋白酶溶液中作为螯合剂，用于中和钙离子和镁离子以防止其抑制胰蛋白酶活性。 去除这些离子会增加酶活性。
丝氨酸蛋白酶抑制剂（包括DFP、TLCK、APMSF、AEBSEF和抑肽酶等）会抑制胰蛋白酶。
Components
胰蛋白酶是由223个氨基酸残基的单链多肽所组成，通过从胰蛋白酶原在Lys - lle肽键处被切割去除N末端六肽而产生。 氨基酸序列通过6个二硫键交联。 这是天然形式的胰蛋白酶——β-胰蛋白酶。 β-胰蛋白酶可以自溶，在Lys-Ser残基处断裂，产生α-胰蛋白酶。 胰蛋白酶是丝氨酸蛋白酶家族的成员。
Caution
本品应置于-10至-40°C环境冷冻储存。避免反复冻融。
Preparation Note
该产品中含有酚红。 由于该产品通过干冰进行运输，所以在包装中会有显著的二氧化碳累积。 这些CO2可能会进入到溶液并略微降低pH，从而产生橙色而非淡粉色的颜色。 这种橙色的溶液依然适合使用，或者也可利用氢yanghuana对pH进行调整。 用过高浓度的胰蛋白酶对细胞进行过长时间的孵育可造成细胞膜的损伤并杀死细胞。 将胰蛋白酶溶解或将其从浓缩液进行稀释应采用不含有Ca2+或Mg2+的缓冲盐溶液。
性质
相关类别分析和工业酶，应用指数，细胞解离，细胞解离（细胞培养测试），细胞解离酶，
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文献和实验问：请问哪位仁兄能告知一下EDTA-胰蛋白酶的配制。急用！多谢！答：1、胰酶是0.25%,这是质量体积比，就是说0.25g胰酶溶于100ml PBS,注意，尽量不要用水来溶，因为要保持渗透压。2、EDTA的工作液溶度是0.02%－0.1%，根据细胞消化的难易程度自己调整。EDTA并不是必须的，容易消化的细胞可不加。EDTA对细胞贴壁性有影响，因此使用时要甚重。如果影响贴壁，但消化时必须要用，那么在用完全培养基终止消化后，可离心弃上清，再加完全培养基培养，可去除EDTA。如果对贴壁没
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，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该
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