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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
Lamp kit for Wessels Brown virus
- 库存:
100
- 供应商:
上海一研
- 规格:
50次
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(最好用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,最大吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm,最大发射光谱在 530nm。
肽基脯氨酸异构酶酶FKBP25抗体
肽基脯氨酸异构酶酶FKBP8抗体
磷酸化叉头蛋白L2抗体
叉头蛋白N2抗体
磷酸化叉头蛋白家族1抗体
磷酸化叉头蛋白家族1抗体
旋转异构酶FKBP6抗体
4号染色体开放阅读框43抗体
韦塞尔斯布朗病毒LAMP试剂盒细丝蛋白3抗体
细丝蛋白2抗体
磷酸化细丝蛋白2抗体
磷酸化FMS样酪氨酸激酶3抗体
肢体畸形相关蛋白FMN1抗体
二甲基苯胺单加氧酶3抗体
二甲基苯胺单加氧酶5抗体
磷酸化脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体
果糖胺-3激酶抗体
甲精结合蛋白3抗体
Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白3A抗体
Ⅲ型纤维连接蛋白域蛋白4抗体
卵泡刺激素结合蛋白2抗体
叶酸盐多谷氨酸合成酶抗体
胚胎干细胞相关蛋白FOPNL抗体
磷酸化癌基因FOS蛋白B抗体
叉头蛋白D2抗体
叉头蛋白E3抗体
叉头蛋白F2抗体
叉头蛋白H1抗体
叉头蛋白I1抗体
磷酸化叉头蛋白4抗体
单跨膜蛋白FOXRED1抗体
FOXRED2蛋白抗体
岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶抗体
细胞外基质蛋白FREM1抗体
原癌基因FRAT1抗体
叉头蛋白D1抗体
凝血因子11重链抗体
凝血因子12轻链抗体
FLAG Tag标签抗体
补体因子I重链抗体
凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体轻链抗体
磷酸化叉头蛋白4抗体
磷酸化叉头蛋白4抗体
甲酸基肽受体1抗体
磷酸化粘着斑激酶抗体
FUT5抗体
叉头蛋白O3A抗体
卵泡相关蛋白1
成纤维细胞生长因子受体5抗体
磷酸化粘着斑激酶抗体
磷酸化粘着斑激酶抗体
口蹄疫病毒A型抗体
FBXO28蛋白抗体
FBXW5蛋白抗体
FBXW12蛋白抗体
FBXO42蛋白抗体
FasL抗体
原纤维蛋白1抗体
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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