猪肺炎支原体LAMP试剂盒

猪肺炎支原体LAMP试剂盒运输及保存：低温运输，-20℃保存，有效期一年。使用本试剂盒提供的阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成分。最好在专门的区域操作。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

(SIRT1)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
衰老关键蛋白3(FBLN3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Fibulin 3 (FBLN3)    96T    Homo sapiens (Human)
叶酸受体1(FOLR1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Folate Receptor 1, Adult (FOLR1)    96T    Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Klotho (KL)    96T    Homo sapiens (Human)
Klotho蛋白(KL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Klotho (KL)    96T    Mus musculus (Mouse)
卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Lecithin Cholesterol Acyltransferase (LCAT)    96T    Homo sapiens (Human)
饥饿素(GHRL)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Ghrelin (GHRL)    96T    Chicken (Gallus)
骨织素(OSTN)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Osteocrin (OSTN)    96T    Mus musculus (Mouse)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1)    96T    Homo sapiens (Human)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1)    96T    Mus musculus (Mouse)
Wolfram综合征蛋白1(WFS1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wolfram Syndrome Protein 1 (WFS1)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 4 (WNT4)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)    96T    Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员2(WNT2)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 2 (WNT2)    96T    Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员1(WNT1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 1 (WNT1)    96T    Homo sapiens (Human)
猪肺炎支原体LAMP试剂盒WNT抑制因子1(WIF1)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for WNT Inhibitory Factor 1 (WIF1)    96T    Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 5B (WNT5B)    96T    Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A)    96T    Homo sapiens (Human)
无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)检测试剂盒(化学发光免疫分析法)    CLIA Kit for Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3A (WNT3A)    96T    Rattus norvegicus (Rat)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意：DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA，后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线（以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体病毒做阳性对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管，分别为 6，5，4，3，2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水（最好用带芯枪头，下同）。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL（注：请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL，建议每次稀释 10 倍，梯度稀释至 10E7 拷贝/μL）。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡 1 分钟，得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头，从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中，充分震荡 1 分钟，得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头，从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中，重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR（见下步），每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值，并以之为纵轴，以浓度的对数值为横轴，绘制标准曲线。
数据采集：
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时，最大吸收光谱在 471nm，结合 DNA 时的最大吸收光谱在 500nm，最大发射光谱在 530nm。
注意事项：
①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。