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琥珀酸-辅酶Q还原酶酶活测定试剂盒

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  • ¥1536
  • 齐源
  • QYS-23015
  • 国产
  • 2025年09月06日
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      999

    • 英文名

      Succinate coenzyme Q reductase activity assay kit

    • CAS号

      微信号19512293839

    • 保质期

      qq1300030701

    • 供应商

      齐源生物

    • 保存条件

      2-8℃低温保存

    QYS-23014 琥珀酸-辅酶Q还原酶酶活测定试剂盒 微量法 100管/96样
    QYS-23015 琥珀酸-辅酶Q还原酶酶活测定试剂盒 可见分光光度法 25管/24样 
    测定意义: 线粒体复合体Ⅱ又称琥珀酸-辅酶Q 还原酶,广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的 线粒体中,催化琥珀酸氧化生成延胡索酸,同时辅基FAD 还原为 FADH2,后者进一步还原 氧化型辅酶Q 生成还原型辅酶 Q,是呼吸电子传递链的支路。 测定原理: 复合体Ⅱ的催化产物还原型辅酶 Q 可进一步还原 2,6-二氯吲哚酚,2,6-二氯吲哚酚在 605nm 有特征吸收峰,通过检测 2,6-二氯吲哚酚的减少速率来计算该酶活性。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量石英比色皿/96 孔板、 研钵、冰和蒸馏水。 
    试剂组成和配制: 
    试剂一:液体 100mL×1 瓶,-20℃保存; 
    试剂二:液体 20mL×1 瓶,-20℃保存; 
    试剂三:液体 1.5mL×1 支,-20℃保存; 
    试剂四:液体 25mL×1 瓶,4℃保存; 
    试剂五:粉剂×1 支,-20℃保存; 
    试剂六:液体 2.5mL×1 瓶,4℃保存; 
    样本的前处理: 
    组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离: 
    1、 准确称取 0.1g 组织或收集 500 万细胞,加入 1mL 试剂一和 10uL 试剂三,用冰浴匀浆 器或研钵匀浆。 
    2、 将匀浆 600g,4℃离心 5min。 
    3、 弃沉淀,将上清液移至另一离心管中,11000g,4℃离心 10min。 
    4、 上清液即为除去线粒体的胞浆蛋白,可用于测定从线粒体泄漏的复合体Ⅱ(此步可选 做)。 
    5、 步骤④中的沉淀即为线粒体,加入 200uL 试剂二和 2uL 试剂三,超声波破碎(冰浴, 功率 20%或 200W,超声 3s,间隔 10 秒,重复 30 次),用于复合体Ⅱ酶活性测定。 
    测定步骤: 
    1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,调节波长至 605nm,蒸馏水调零。 
    2、 样本测定 
    (1) 工作液的配制:临用前把试剂五转移到试剂四中混合溶解,置于 37℃(哺乳动物)或 25℃(其它物种)孵育 5min;用不完的试剂分装后-20℃保存,禁止反复冻融。 
    (2) 在微量石英比色皿或 96 孔板中加入 10μL 样本、25μL 试剂六和 200μL 工作液,立 即混匀,记录 605nm 处初始吸光值 A1 和 2min 后的吸光值 A2,计算 ΔA=A1-A2。
    齐源生物专业代测高效液相服务:
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