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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
10
- 供应商:
广东固康生物科技有限公司
- 检测范围:
——
- 检测方法:
酶联免疫法
- 应用:
——
- 适应物种:
人
- 标记物:
——
- 样本:
血清/血浆/精浆
- 规格:
96人份(复孔检测样本:40个)/盒
通用名称:阿狄科®弹性酶检测试剂盒(酶联免疫法)(1点校准)
英文名称:IDK® PMN-Elastase(1-point calibration; serum, plasma) ELISA
规格:96人份(复孔检测样本:40个)/盒
测试次数:96(40份样本一式两份)
【预期用途】
本产品用于定量测定血清、血浆和精浆中的人多形核白细胞弹性蛋白酶(PMN elastase)。仅供科研使用。仅用于体外诊断。
【背景知识】
来自人类多形核粒细胞的人多形核白细胞弹性蛋白酶是一种30 kDa的糖蛋白,属于丝氨酸蛋白酶。刺激或解体后,活性PMN弹性蛋白酶从嗜中性粒细胞的嗜铜粒释放。
样本要求:血清、血浆和精浆
储存条件:本产品在2-8℃下保存,可稳定至标签所示日期。
参考文献:
1. Derhaschnig, Ulla, Rosemarie Reiter, Paul Knöbl, Magdalena Baumgartner, Priska Keen, and Bernd Jilma. 2003. “Recombinant Human Activated Protein C (rhAPC; Drotrecogin Alfa [activated]) Has Minimal Effect on Markers of Coagulation, Fibrinolysis, and Inflammation in Acute Human Endotoxemia.” Blood 102 (6) (September 15): 2093–8. doi:10.1182/blood-2003-02-0416.
2. Eggert-Kruse, W, K Zimmermann, W Geissler, A Ehrmann, R Boit, and T Strowitzki. 2009. “Clinical Relevance of Polymorphonuclear (PMN-) Elastase Determination in Semen and Serum during Infertility Investigation.” International Journal of Andrology 32 (4) (August): 317–29. doi:10.1111/j.1365-2605.2007.00852.x.
3. Heinichen, Cornelia, Frank Buessecker, Birgit Arndt, Heinrich Schmidt-Gayk, and Michael D. Kramer. 1995. “PMN-Elastase in Faezes: Etablierung Eines Lumineszenz-Immunoassays Und Prüfung Der Diagnostischen Relevanz Bei Morbus Crohn.” Clinical Laboratory 41: 539–545.
4. Hoang, Long Truong, David J Lynn, Matt Henn, Bruce W Birren, Niall J Lennon, Phuong Thi Le, Kien Thi Hue Duong, et al. 2010. “The Early Whole-Blood Transcriptional Signature of Dengue Virus and Features Associated with Progression to Dengue Shock Syndrome in Vietnamese Children and Young Adults.” Journal of Virology 84 (24) (December 15): 12982–94. doi:10.1128/JVI.01224-10.
5. Oremek, G M, and D Schneider. 1995. “PMN-Elastase.” MTA 10 (4): 273–278.

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文献和实验10% 胎牛血清。细胞培养物均根据 ATCC 的建议使用标准细胞培养方法维持和收获。 球状体形成的初始接种密度取决于细胞类型、球状体形式的生长期持续时间以及分析时球状体所需尺寸等因素。为更好地评估球状体的形成和生长,使用 96 孔球形微孔板在每孔 100 µL 生长培养基中以 40、200、1,000、5,000 和 10,000 个细胞的密度进行接种。通过CellTiter-Glo® 3D细胞活力测定法在 0、24、48 和 72 小时分别对球状体培养物进行分析。上述所有细胞系采用同一接种
把BCA工作缓冲液和样品滴加在Take3板的微孔处,不需要先在其它容器混匀进行颜色反应。这样做的好处是可以提高操作的便捷性,每次检测只需要2ul样品,非常节约样品。实验材料和方法检测试剂盒(Sigma-Aldrich公司)、小牛血清(BSA)(Sigma-Aldrich公司)。我们使用两种实验方法来进行BCA检测。第一种方法按照NanoDrop技术手册推荐的“Mini-BCA”法。其简要流程是:BCA检测系统混合好的10ulBCA工作缓冲液和10ul的标准蛋白或待测的10μl样品(1:1)在试管中混匀
)。每板设对照(加100(储存液100 1640)。2)置37℃,5%CO2孵育16-48小时,倒置显微镜下观察。3)每孔加入10 ul MTT溶液(5 mg/ml,即0.5%MTT),继续培养4 h。(悬浮细胞推荐使用WST-1,培养4 h后可跳过步骤4),直接酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准)测量各孔的吸光值)4)离心(1000转x10min),小心吸掉上清,每孔加入100 ul二甲基亚砜,置摇床上低速振荡10 min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪OD570nm(630nm校准
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