Human HMGB-1(High mobility gro

服务承诺：
一、质量保证,有问题免费包换；
二、提供免费代测服务为客户提供来样检测服务,zui大限度实验结果的有效性；
三、提供全程技术指导。

产品名称	人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)酶联免疫吸附测定试剂盒
英文名称	Human HMGB-1(High mobility group protein B1) ELISA Kit
货号	XGH6321

用途：
该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组HMGB-1浓度
检测原理
本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗人HMGB-1抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人HMGB-1会与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗人HMGB-1抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗人HMGB-1抗体与结合在包被抗体上的人HMGB-1结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，HMGB-1浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中HMGB-1的浓度。
反应类型    夹心法
规格    96T
反应时间    3.5h
反应性    Human
检测方法    Colormetric
检测范围    31.25—2000 pg/mL
灵敏度    18.75 pg/mL
样本体积    100μL
样本类型    血清，血浆或其他生物体液
特异性
可检测样本中的人HMGB-1，且与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性
板内，板间变异系数均<10%。
典型数据
由于实验操作条件的不同（如操作者、移液技术、洗板技术和稳定条件等），标准曲线的OD值会有所差异。以下数据和曲线仅供参考，实验者需根据自己的实验建立标准曲线。

试剂和样本的控制方法：
一、试剂
1.试剂的选择：国家明确要求要采用批批检定的形式对ELISA试剂严格把关，我司严格按照进行，已获得国家承认的“三证”，每一个产品都有对应的批号，只要客户提前下单，我们就能为您提供新批次的产品，不必担心会有过期的试剂。我司的试剂，值得您选择。
2.试剂的准备：先将试剂盒先从冰箱中拿出来，在室温下放置20-30 min后，再进行测定，使试剂盒在使用前与室温平衡，这样做的目的能使反应微孔内的温度较快地达到所需的温度，以满足后面的测定需求。
二、样本
1.内源性干扰因素：包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白、异嗜性抗体、某些自身抗体等；
类风湿因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②标本用联有热变性IgG的固相吸附剂处理；
③检测抗原时，可用加入到标本稀释液中使RF降解。
注意事项：
1加样：
①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以(OPD)为底物，则试剂盒提供剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
WNT9B ELISA Kit    脱氧胸苷酸激酶DTYMK抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员9B(WNT9B)ELISA试剂盒
WNT7B ELISA Kit    双特异性蛋白磷酸酶10抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员7B(WNT7B)ELISA试剂盒
WNT7A ELISA Kit    双特异性蛋白磷酸酶5抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员7A(WNT7A)ELISA试剂盒
WNT5B ELISA Kit    磷酸化酶动力蛋白1抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员5B(WNT5B)ELISA试剂盒
WNT5A ELISA Kit    酶动力蛋白1抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员5A(WNT5A)ELISA试剂盒
WNT4 ELISA Kit    磷酸化酶动力蛋白1抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员4(WNT4)ELISA试剂盒
WNT3A ELISA Kit    脑啡肽A抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员3A(WNT3A)ELISA试剂盒
WNT3 ELISA Kit    强直性肌营养不良相关蛋白9抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员3(WNT3)ELISA试剂盒
WNT2 ELISA Kit    DYX1C1蛋白抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员2(WNT2)ELISA试剂盒
WNT11 ELISA Kit    E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员11(WNT11)ELISA试剂盒
WNT10B ELISA Kit    三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX23抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员10B(WNT10B)ELISA试剂盒
WNT10A ELISA Kit    多能发育相关基因5抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员10A(WNT10A)ELISA试剂盒
WNT1 ELISA Kit    三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体        无翅型MMTV整合位点家族成员1(WNT1)ELISA试剂盒
ASPN ELISA Kit    磷酸化三磷酸腺苷依赖解旋酶DDX3抗体        无孢蛋白(ASPN)ELISA试剂盒
COIL ELISA Kit    迪格弗-梅尔基奥尔-克劳森综合征相关蛋白抗体        蜗管蛋白(COIL)ELISA试剂盒
STAB2 ELISA Kit    双氧化酶激活因子2抗体        稳定素2(STAB2)ELISA试剂盒
STAB1 ELISA Kit    RNA结合泛素连接酶DZIP3抗体        稳定素1(STAB1)ELISA试剂盒
FZD10     Protein    Human    重组人 Frizzled-10 / FZD10 蛋白 (Fc 标签)
KIRREL     Protein    Human    重组人 KIRREL / NEPH1 / KIRREL1 蛋白 (Fc 标签)
MUSTN1     Protein    Human    重组人 MUSTN1 蛋白 (His 标签)
ATOX1     Protein    Human    重组人 ATOX1 / HAH1 蛋白 (His 标签)
RBKS     Protein    Human    重组人 RBKS / Ribokinase 蛋白 (His 标签)
BIRC7     Protein    Human    重组人 BIRC7 / Livin 蛋白 (His 标签)
RAB31     Protein    Human    重组人 RAB31 / Rab22B 蛋白 (His 标签)
TPPP2     Protein    Human    重组人 TPPP2 蛋白 (His 标签)
EIF5A     Protein    Human    重组人 EIF5A 蛋白 (His 标签)
LIF     Protein    Human    重组人 LIF 蛋白
SCGB3A1     Protein    Human    重组人 SCGB3A1 / HIN-1 蛋白 (Fc 标签）
MMP26     Protein    Human    重组人 MMP-26 / Matrix metalloproteinase-26 蛋白
IL2     Protein    Human    重组人 IL2 / Interleukin-2 蛋白 (L35M, L36S, C142A)
HIST2H4A     Protein    Human    重组人 Histone H4 / HIST2H4A 蛋白
CD48     Protein    Human    重组人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 标签)
NLN     Protein    Human    重组人 Neurolysin / NLN 蛋白 (His 标签)
CSF2     Protein    Human    重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白
CSF2     Protein    Human    重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白
GALNT10     Protein    Human    重组人 GALNT10 / GalNAc-T10 蛋白 (His 标签)
DRAXIN     Protein    Human    重组人 DRAXIN 蛋白 (His 标签)
Human HMGB-1(High mobility group protein B1) ELISA KitRGS1     Protein    Human    重组人 RGS1 蛋白 (His 标签)
CPVL     Protein    Human    重组人 CPVL / Carboxypeptidase 蛋白 (His 标签)
CD177     Protein    Human    重组人 CD177 / PRV-1 / PRV1 蛋白 (Fc 标签)
MUC1     Protein    Human    重组人 Mucin-1 / MUC-1 蛋白 (Fc 标签)
操作流程：
1待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
2酶标板置4℃，包被过夜。
3洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。 
5酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
6洗板，同4。 
7每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
8酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
9洗板，同4。 
10每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
11每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。 
12分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。