巴氏吸管5ml(无菌,PE,独立包装)，LS80025

磁珠分选柱手工操作分离小鼠CD4+ CD25+抑制性细胞

实验材料： 1. 小鼠 2. HBSS洗涤缓冲液 3. MACS缓冲液 4. CD8a（Ly-2）磁珠 5. 结合缓冲液 6. biotin-抗CD25（7D4） 7. Streptavidin-PE 8. 抗PE磁珠 9. 完全RPMI培养基 10. 小鼠CD3+ T细胞富集柱和1×纯化柱缓冲液 11. 15ml离心管，无菌 12. autoMACS系统和分选柱

小鼠腹水及单细胞悬液制备及注意事项

加入适量红细胞裂解液裂解红细胞（可加入 500 μL 1× 红细胞裂解液重悬细胞，室温裂解 2 min 后，立马加入 10 mL PBS，300 g 离心 5 min 后弃上清）。 若提取的腹腔巨噬细胞需培养，请注意无菌操作。 收集腹水时，从小鼠左侧（肠道较多）注射 PBS，从右侧（器脏较大）抽腹腔灌洗液，注意不要扎到器脏。 小鼠腹腔灌洗液收集细胞比较脆弱，加细胞染色缓冲液有利于细胞的保存，但建议当天及时检测。 小鼠腹腔灌洗液中大多数为巨噬细胞，巨噬细胞检测需要封闭Fc受体，此时可使用小鼠 CD16/32纯

对外周血中人自然杀伤（NK）细胞群的表型表征分析

中。5. 用无菌 PBS 将上述锥形试管填满（至 50 mL)。介绍样品制备。6. 洗涤。在室温、低速制动条件下，以 300 X g 离心分离试管 10 分钟。7. 裂解红细胞（BD 产品目录号：555899，10 x 溶液。在蒸馏水中使用 1 x 溶液。室温孵育 15 分钟。）8. 将 1x106 PBMC 重悬于 20 μL 染色缓冲液中（PBS 含有 5% 正常人血清）。9. 加入抗体：CD117-BV421 (c-kit)、CD7-BV510、CD57- BV605、CD8-BV650