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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
23
- 样本:
serum, plasma
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
Homo sapiens (Human)
- 应用:
详见说明书
- 检测方法:
Competitive
- 检测范围:
0.078 μg/mL-20 μg/mL
- 规格:
96T
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| 产品名称 | 英文名称 | 货号 |
| 人免疫球蛋白轻链kappa(κ-IgLC)ELISA Kit | Human kappa immunoglobulin light chain,κ-IgLC ELISA Kit | XG-E103737 |
中文名称: 人免疫球蛋白轻链kappa(κ-IgLC)ELISA Kit
规格:96T
别名:kappa immunoglobulin light chain, kappa-IgLC
种属:Homo sapiens (Human)
样本类型:serum, plasma
检测范围:
0.078 μg/mL-20 μg/mL
灵敏度:0.046 μg/mL
反应时间:1-5h
样本体积:50-100ul
检测波长:450 nm
研究领域:Immunology
测定原理:quantitative
测定方法:Competitive注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2温育:
如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3洗板:
手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以(OPD)为底物,则试剂盒提供片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
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