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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存：
40
- 英文名：
ATTO 532，SE
- 保质期：
详见说明书
- 供应商：
上海西格
- 保存条件：
低温保存
- 规格：
1mg 5mg 100mg
操作步骤 :
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称: ATTO 532琥珀酰亚胺酯
英文名称 ATTO 532，SE
规格: 1mg 5mg 100mg
分类 PCR荧光核酸试剂
下面就向大家介绍实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
PCR实验步骤
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是ATTO 532琥珀酰亚胺酯的相关产品：
Spongouridine 3083-77-0 中文名：阿糖尿苷 分子式：C9H12N2O6 度：98.0% 关键词： 小鼠溶菌酶试剂盒elisa试剂盒 小鼠溶菌酶试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠溶菌酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠溶菌酶试剂盒、小鼠溶菌酶试剂盒elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Soyacerebroside II 115074-93-6 中文名：大豆脑苷II 分子式：C40H75NO9 度：98.0% 关键词： 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠尿激酶elisa试剂盒 小鼠尿激酶试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠尿激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠尿激酶试剂盒、小鼠尿激酶elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Soyacerebroside I 114297-20-0 中文名： 分子式：C40H75NO9 度：95.0% 关键词： 抗溃疡; 番杏; 大豆; 大蒜; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠活化素elisa试剂盒 小鼠活化素试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠活化素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠活化素试剂盒、小鼠活化素elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Sorafenib tosylate 475207-59-1 中文名：索拉非尼 分子式：C28H24ClF3N4O6S 度：98.0% 关键词： 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Sorafenib 284461-73-0 中文名：索拉非尼 分子式：C21H16ClF3N4O3 度：98.0% 关键词： 小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
无内质粒小量提取试剂盒 50T Androstenedione 中文名：雄烯二酮 分子式：C19H26O2 度：98.0%
无内质粒大量提取试剂盒 5T Androstenone hydrazone 6
3015-10-1
中文名：雄酮腙 分子式：C19H30N2O 度：98.0%
无菌甘油 100ml Androstenedione
1963/5/8
中文名：雄烯二酮 分子式：C19H26O2 度：98.0% 关键词：
胃泌素 (Gasin) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Aspirin 中文名：阿司匹林 分子式：C9H8O4
胃泌素 英文名称： Gasin 规格： 48T/96T 英文缩写： G Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式：C21H32O3 度：98.0% 关键词：
二（MDA）检测 Malondialdehyde (MDA) detection Xanthorin 17526-15-7 中文名： 分子式：C16H12O6
二（MDA）测定试剂盒（TBA法） Ranolazine di 95635-56-6 中文名：盐酸雷诺嗪 分子式：C24H35Cl2N3O4 度：98.0% 关键词：
鹅特定基因序列(Goose)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Phenformin 114-86-3 中文名：苯乙双胍 分子式：C10H15N5 度：98.0% 关键词：
鹅特定基因序列(Goose)核酸检测试剂盒 48T Phenformin 114-86-3 中文名：苯乙双胍 分子式：C10H15N5
多功能DNA化回收试剂盒 Multifunctional DNA purification and recycling Kit Axitinib 中文名：阿西替尼 分子式：C22H18N4OS
ATTO 532琥珀酰亚胺酯NADP0酸酶（NADPase）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol 903-67-3 中文名： 分子式：C21H34O3 度：98.0% 关键词： 抗增殖; 孕甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
Mouseai-thyroid-globulinaibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
mouse SDF-1 a 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D Glimepiride 93479-97-1 中文名：格列美脲 分子式：C24H34N4O5S 度：98.0% 关键词：
mouse Flt3 Ligand 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D Malic acid 4-Me ester 6
6178-02-7
中文名： 分子式：C5H8O5 度：% 关键词： 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
mouse CD 40L ELISA Kit 作用： ELISA 规格： 96T 奥地利 Bender Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 109837-85-6 中文名： 分子式：C19H34O3 度：% 关键词：
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
产品名称: ATTO 532琥珀酰亚胺酯
英文名称 ATTO 532，SE
规格: 1mg 5mg 100mg
分类 PCR荧光核酸试剂
下面就向大家介绍实验方法步骤：
方法
1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR反应鉴定——PCR反应条件:
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 5 min | 1 |
| 变性 | 94℃ | 10 sec | 30-40 |
| 退火 | 50-65℃ | 20 sec | 30-40 |
| 延伸 | 72℃ | 30 sec/kb | 30-40 |
| 终延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
典型的PCR由
（1）高温变性模板；
（2）引物与模板退火；
（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。
PCR检测方法包括以下步骤：
(1)将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线；
(2)待测样本与步骤(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中步骤(1)为：将参照基因与待测目的基因片段等比例连接，克隆到同一个质粒载体上，构建一种可同时用于参照基因以及待测目的基因扩增检测的标准品，并将所得标准品按照浓度梯度稀释后同时用于绘制参照基因以及待测目的基因的标准曲线。
其中所述参照基因为本领域常规参照基因，较佳地管家基因，优选地为RPPH1的扩增区域，其中所述质粒载体为本领域常规质粒载体，较佳地为PCR克隆载体，优选地为TA cloning载体，所述TA cloning载体较佳地为pMD18-T载体。其中所述标准品的核酸序列如序列表中SEQ ID NO:6所示。所述的等比例较佳地为1：1。由于标准品中待测目的基因与参照基因的比例为1:1，解决了目前相对标准曲线法应用中目的基因与参照基因的浓度比例关系难以控制的问题，提高HER2基因扩增检测的可靠性。
步骤(2)为：待测样本与步(1)所述标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后，目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数，计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值，即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
其中所述待测目的基因为本领域常规待测目的基因，较佳地为肿瘤或者疾病的特异性基因，更佳地为HER2基因的扩增区域，所述荧光定量PCR扩增为本领域常规荧光定量PCR扩增方法，所述荧光定量PCR扩增方法较佳地为多通道荧光定量PCR扩增，更佳地为双通道荧光定量PCR扩增。
以下是ATTO 532琥珀酰亚胺酯的相关产品：
Spongouridine 3083-77-0 中文名：阿糖尿苷 分子式：C9H12N2O6 度：98.0% 关键词： 小鼠溶菌酶试剂盒elisa试剂盒 小鼠溶菌酶试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠溶菌酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠溶菌酶试剂盒、小鼠溶菌酶试剂盒elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Soyacerebroside II 115074-93-6 中文名：大豆脑苷II 分子式：C40H75NO9 度：98.0% 关键词： 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠尿激酶elisa试剂盒 小鼠尿激酶试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠尿激酶试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠尿激酶试剂盒、小鼠尿激酶elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Soyacerebroside I 114297-20-0 中文名： 分子式：C40H75NO9 度：95.0% 关键词： 抗溃疡; 番杏; 大豆; 大蒜; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库 小鼠活化素elisa试剂盒 小鼠活化素试剂盒 规格型号：96T/48T 小鼠活化素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：elisa试剂盒（进口分装），产品别名：小鼠活化素试剂盒、小鼠活化素elisa试剂盒 保存条件：2-8℃ 保质期：6个月。
Sorafenib tosylate 475207-59-1 中文名：索拉非尼 分子式：C28H24ClF3N4O6S 度：98.0% 关键词： 小鼠氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISAKit ELISA. 96T/48T
Sorafenib 284461-73-0 中文名：索拉非尼 分子式：C21H16ClF3N4O3 度：98.0% 关键词： 小鼠还原型谷胱甘肽(GSH)ELISAKit ELISA. 96T/48T
无内质粒小量提取试剂盒 50T Androstenedione 中文名：雄烯二酮 分子式：C19H26O2 度：98.0%
无内质粒大量提取试剂盒 5T Androstenone hydrazone 6
无菌甘油 100ml Androstenedione
胃泌素 (Gasin) 作用： ELISA 规格： 48T/96T 进口分装 Aspirin 中文名：阿司匹林 分子式：C9H8O4
胃泌素 英文名称： Gasin 规格： 48T/96T 英文缩写： G Androstenediol-3-acetate 1639-43-6 中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯 分子式：C21H32O3 度：98.0% 关键词：
二（MDA）检测 Malondialdehyde (MDA) detection Xanthorin 17526-15-7 中文名： 分子式：C16H12O6
二（MDA）测定试剂盒（TBA法） Ranolazine di 95635-56-6 中文名：盐酸雷诺嗪 分子式：C24H35Cl2N3O4 度：98.0% 关键词：
鹅特定基因序列(Goose)核酸检测试剂盒(PCR-荧光探针法) 48T Phenformin 114-86-3 中文名：苯乙双胍 分子式：C10H15N5 度：98.0% 关键词：
鹅特定基因序列(Goose)核酸检测试剂盒 48T Phenformin 114-86-3 中文名：苯乙双胍 分子式：C10H15N5
多功能DNA化回收试剂盒 Multifunctional DNA purification and recycling Kit Axitinib 中文名：阿西替尼 分子式：C22H18N4OS
ATTO 532琥珀酰亚胺酯NADP0酸酶（NADPase）测试盒 可见分光光度法 50管/48样 Pregn-5-ene-3β,17α,20S-triol 903-67-3 中文名： 分子式：C21H34O3 度：98.0% 关键词： 抗增殖; 孕甾烷; 中药对照品; 中药标准品; 植物提取物; 天然产物; 天然产物库
Mouseai-thyroid-globulinaibody,TGABELISAKit 小鼠抗甲状腺球蛋白抗体(ATGA/TGAB)ELISA试剂盒 96T/48T 进口分装
mouse SDF-1 a 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D Glimepiride 93479-97-1 中文名：格列美脲 分子式：C24H34N4O5S 度：98.0% 关键词：
mouse Flt3 Ligand 作用： ELISA 规格： 96T 美国 R&D Malic acid 4-Me ester 6
mouse CD 40L ELISA Kit 作用： ELISA 规格： 96T 奥地利 Bender Methyl (9Z,11E)-13-hydroxyoctadeca-9,11-dienoate 109837-85-6 中文名： 分子式：C19H34O3 度：% 关键词：
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偶联物，最大限度的提高了信噪比。图2. CF染料的超强特异性；由于AF染料制备过程中含有大量带负电的磺化基团，容易非特异性结合正电基团，请看AF790 Dye与CF790的条带特异性对比。3. 优异的标记效率生物偶联后的活性染料一般很容易水解，会在运输，操作及储存中带来诸多不便，最终致染料结合效率低下。像Alexa Fluor® dyes,DyLight? dyes and IRDyes®等严重的磺化作用有较强的吸湿性，恶化水解作用等问题。例如： AlexaFluor® 488 在应用时琥珀酰亚胺脂酯
反应。几乎所有可用于偶联反应的活泼酯都可用于合成环肽，主要有对硝基酚酯、N-羟基琥珀酰亚胺酯、五氟苯酯和2，4，5-三氯苯酚酯。线性多肽的C端羧基与对硝基酚、N-羟基琥珀酰亚胺、五氟苯酚或2，4，5-三氯苯酚，在DCC或其他缩合剂存在下，于低温反应，很容易得到相应的活泼酯。这种N端通常带有BOC或Z保护的活泼酯在酸性条件下脱去保护基，形成活泼酯的氢卤酸盐，在弱碱性稀溶液中，如在吡啶，DMF或二氧六环一类介电常数较大的溶剂中，保持pH8～9，加热（60～100℃）或室温搅拌数小时至数日，最终可得到环肽
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