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文献和实验溶解后跑电泳,跑出条带了,但是是上面和下面各一条清晰的条带,中间有一团像是很多条带一样不清晰的,按道理应该是提出RNA了的,因为看到了直径约1mm的白色膜状沉淀,说明还是可以提出RNA,但是另一个问题是我实验时因为干预因素较贵,不能用这么多细胞,只能用10*6个细胞800ul培养基在24孔板培养,所以不知道这么少的细胞提RNA能行不,有人跟我说这么少的细胞只用加10ul的Trizol,加多了会稀释,因为血标本来之不易,我没敢试,想问问这么少的Trizol可以吗,谢谢! xia1015q
保存。 13、如何鉴定提取的外泌体? 通常会用到:透射电镜检测(形态)、NTA 粒径检测(大小)、Western Blot 检测等方法对提取的外泌体进行鉴定。在进行 Western Blot 检测时,常用的外泌体标志蛋白有CD63、CD9、CD81、TSG101 等。 14、提取的外泌体进行 Western Blot 前是否需要加入 RIPA 试剂裂解? 需要。一般按照 1:1 的比例加入强 RIPA 试剂,或推荐使用外泌体蛋白专用裂解液。 15、进行外泌体 Western Blot 鉴定时有无内参
(一)细胞爬片的制备 (1)如果使用载玻片或盖玻片,必须在使用之前灭菌。可以一次灭菌并贮存在无菌状态下。如果使用少量的盖玻片,用金属镊子夹住盖玻片,在70%乙醇中浸泡,然后在火焰上烤干。要轻轻地镊取,以防破裂。为了方便起见,可以将盖玻片浸泡于70%的乙醇中,使用时放在火焰上处理。如果使用的盖玻片或载玻片数量较多,可以将它们放于专用的金属支架上,然后高压消毒。如果需要的数量更大,则可将其放在耐热的容器中,干烤2小时。 (2)在无菌状态下,把干燥的玻片放于适当的培养皿中。盖玻片
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