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杭州铂赛细胞实验室
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杭州铂赛生物科技有限公司
TUNEL技术:
即脱氧核苷酸末端转移酶(Term ina12deoxyruucleo t idyl t ransferase,TdT )介导的x2dU TP缺口末端标记(TdT 2m ediatedx2dUJ TP n ick end 1abeling,TUNE)技术是目前原位检测细胞调亡最敏感、快速、特异的新方法,已广泛用于生物、医学研究领域。TdT-mediated dUJTP-biotin nick end labeling (TUNEL)是一种用来检测细胞凋亡(apoptosis)的分析方法.细胞凋亡有一项重要的特征为细胞内的DNA 会碎裂成片段(DNAfragmentation),TUNEL可以有效的去探测DNA片段的产生,所以可以传达细胞调亡的讯息..TdT为termina1 deoxynucleotidy1 transferase,此种酵素可以在没有DNA模板的情形下,连结核甘酸到 DNA的3'-OH处.1992年,以色列科学家Gavrie1i等人将TaT引为为标定DNA片段的一个酵素,自此衍生出TUNEL此项技术.TUNEL的好处是可以在细胞凋亡发生的早期,即可侦测到 DNA片段的产生,并且可以直接使用在组织切片上,观察细胞凋亡发生的位置.所以TUNEL目前为广泛接受与使用的一种细胞调亡的分析方法。
其他细胞检测分析平台:
| MTT细胞活力检测 | CCK-8细胞株增殖检测 | Annexin V/PI 检测 |
| Caspase系列检测 | 原位末端凋亡法 (TUNEL)检测 | SA-β-gal染色细胞衰老检验 |
| 流式细胞术检测 | 细胞运动能力: 趋势/侵袭/划痕/粘附 |
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文献和实验References [1] Danise P, Amendola G, Di CR, et al. Nucleated red blood cells and soluble transferrin receptor in thalassemia syndromes: relationship with global and ineffective erythropoiesis. Clin Chem Lab Med. 2009. 47(12): 1539-42. STABLE
一、TUNEL法的实验原理 细胞发生凋亡时, 染色体DNA双链或单链断裂产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal -deoxynucleotidyl transferase mediated nick end labeling, TUNEL)。由于正常的或正在增殖
ziweihua 求助高人啊,我想用斑马鱼整体胚胎检测其细胞凋亡情况,选用的Roche的in situ cell death detection kit, POD. 按照其中的贴壁细胞或细胞涂片的方法做了两遍,可是连阳性对照都没有信号。后来查找到一篇论文中的方法,如下: a,收集胚胎后用PBS清洗,转移到1.5ml的EP管内,4%多聚甲醛PBS固定过 夜 b,用PBS配制 25%50%75%的梯度酒精,每次5min将胚胎梯度脱水。









