不含EDTA的cOmplete™蛋白酶抑制剂混合物

献给初学者：手把手教你做免疫共沉淀实验

，直到全部溶解，用 HCl 调节 PH 值到 7.4； 2.加 10 ml 10% 的 NP-40； 3.加 2.5 ml 10% 的去氧胆酸钠，搅拌，直到溶液澄清； 4.加 1 ml 100 mM 的 EDTA，用量筒定容到 100 ml，2～8 ℃ 保存； 5.理论上，蛋白酶和磷酸酯酶抑制剂应该在使用当天同时加入（抑蛋白酶肽，亮抑酶肽, 胃蛋白酶抑制剂各 100 μl；PMSF，Na3VO4，NaF 各 500 μl），但是 PMSF 在水溶液中很不稳定，30 分钟就会降解一半，所以 PMSF 应该

增进RNAi分析的强大工具

2）。 图2 使用BLOCK-iT™ Complete Dicer RNAi Kit得到＞80％的靶定基因阻断 经Dicer酶切的，来源于β-半乳糖苷酶或者荧光素酶的dsRNA产生siRNA（d-siRNA）库，用来确定d-siRNA特异阻断基因活性的效果。GripTite™ 293 MSR 细胞共转染pcDNA™1.2/V5-GW/lacZ阳性对照质粒和pcDNA™5/FRT/luc，分别独自表达β-gal或者荧光素酶报告子，或者50ng luc 或者lacZ d-siRNA。对于每一种报告子

【求助】如何使用抑制剂？

份都稳定和无毒，能提供安全和可靠的保护，这种混和片有不含EDTA的配方，这样就更不会影响依赖金属的蛋白的活性，并可确保有效进行一些纯化工作（如应用Poly-His）标记的蛋白）。 其实重要的是这种片剂操作方便：只要将一片completeTM 加进缓冲液，便可抑制多种不同的蛋白酶，有效地保护目的蛋白，效果明显，免除了称量个别抑制剂的麻烦。一举两得，何乐而不为呢？ 另外针对磷酸酶，罗氏也推出了一种PhosSTOP磷酸酶抑制剂混合片（可以与complete蛋白酶抑制剂兼容