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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
4度
- 英文名:
SD/–His/–Leu/–Trp/–Ura with Agar
- 库存:
999
- 供应商:
Biorigin
- 规格:
10×0.5L
SD+缺陷型氨基酸-琼脂 四缺
一、酵母培养基种类及用途
一缺培养基
用于单质粒酵母转化筛选,外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交和酵母双杂交初始质粒转化。
二缺培养基
用于双质粒酵母转化筛选,外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互补、酵母单杂交和酵母双杂交初始质粒转化免疫共沉淀,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母杂交实验, 接合型二倍体筛选。
三缺培养基
用于双质粒酵母转化筛选和报告基因检测,外源基因在酵母中的表达、异源基因功能互 补、酵母单杂交和双杂交报告基因检测,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配实验后报 告基因分析(His3,Ade2)。
四缺培养基
用于报告基因分析,酵母双杂交和酵母三杂交报告基因检测,Y187、AH109/Y2HGold、NMY51 酵母交配实验后报告基因分析(His3,Ade2)。
五缺培养基
用于报告基因分析和表型分析,酵母三杂交报告基因检测(His3,Ade2)、酵母营养缺 陷型分离鉴定和表型分析。
六缺培养基
用于报告基因分析、表型分析和药物毒理分析,酵母三杂交报告基因检测、酵母营养缺 陷型分离鉴定和表型分析、药物毒理分析。
Rich medium
Rich medium 包括 YPD、YPDA、YPD Plus 系列培养基,也可以称为完全培养基。 YPD Medium 由精选的蛋白胨、酵母提取物和葡萄糖按适当比例混合组成;YPDA 培养基是 在 YPD 培养基中添加了适量的硫酸腺嘌呤;YPD Plus 相比于 YPDA 的营养更为丰富, 可直接用于酿酒酵母感受态的复苏,可以提高转化效率。YPD Agar、YPDA Agar 分别在 YPD、YPDA 基础上加入了 Agar,作为固体培养基倒板用。YPD 系列培养基用于酿酒酵母 的常规培养。
二、酵母培养基的配制
(1) Rich Liquid Media (Broth)
1. 取 50g 的 YPD/YPDA 加 1L 的去离子水中溶解;
2. 调节 pH 至 6.5,121℃高压灭菌 15min;
3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。
(2) Rich Plating Media with Agar
1. 取 70g 的 YPD Agar/YPDA Agar 加 1L 的去离子水中溶解(琼脂在高温灭菌后溶解);
2. 调节 pH 至 6.5,121℃高压灭菌 15min;
3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。
(3) Minimal SD Base
1. 在 1L 去离子水中加入 26.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相应量的缺陷氨基酸, 搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 避光、室温条件下储存灭菌培养基。
(4) Minimal SD Agar Base
1. 在 1L 去离子水中加入 46.7g 的 Minimal SD Base,然后再加入相应量的缺陷氨基酸, 搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。
(5) DO(缺陷氨基酸)类培养基的配制
1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 DO 培养基,然后再加入 26.7g Minimal SD Base,搅拌 溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
或:1. 在 900ml 去离子水中加入相应量的 DO 培养基,然后再加入 6.7g YNB,搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基;
4. 使用时再加入 100ml 已灭菌的 20%葡萄糖。
(6) SC(缺陷氨基酸+YNB)类培养基的配制
1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 SC 培养基,然后再加入 20g 葡萄糖,搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基;
或:1. 在 900ml 去离子水中加入相应量的 SC 培养基,搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基;
4. 使用时再加入 100ml 已灭菌的 20%葡萄糖。
(7) SD(缺陷氨基酸+YNB+葡萄糖)类培养基的配制
1. 在 1L 去离子水中加入相应量的 SD 培养基,搅拌溶解;
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 4℃冰箱避光储存已经灭菌的液体培养基。
(8) SD with Agar(缺陷氨基酸+YNB+葡糖糖+Agar)类培养基的配制
1. 在 1L 去离子水中加入相应量 SD with Agar 培养基,搅拌溶解(琼脂在高温灭菌后溶解);
2. 调节 pH 至 5.8,121℃高压灭菌 15min;
3. 冷却到 50℃把培养基倒入平板中,室温使其凝固,封口膜封好后倒置保存在 4℃冰箱。
注意事项:
1. 在配制酵母缺陷培养基时,培养基会变色,由浅黄到深褐色不等,对酵母的生长不会产 生严重影响。
2. DO 类和 SC 类培养基均不含葡萄糖。葡萄糖高温灭菌会有碳化现象,控制好灭菌温度和时间,葡萄糖的微量碳化对实验并无太大影响。如有特殊要求可将 20%葡萄糖单独灭菌,待使用时再加入。
3. 缺陷培养基的 PH 值在 5.5-6.5 范围内都是比较适合酵母生长的,此类试剂粉末的 PH 已 经过调试,使用时只需要稍微调整即可。
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文献和实验ml D. 20×Leu 25.0ml E. Agar 10.00g F. ddH2O → 500.0ml 90-100mm)f铺20-25块平板( 11. 挑取上述固体培养基上生长的含有目的DNA(X)的pLexA-X(+)或空载pLexA(-)单菌落,分别接种SD/Gal/Raf/-Ura,-His,-Trp,-Leu固体诱导培养板,30℃倒置培养3-5天。 SD/Gal/Raf/-Ura,-His,-Trp,-Leu固体诱导
below).a. From a solid patch of growth:i. Spread a thin film of yeast cells (~2-cm2 patch) onto the appropriate SD agar medium.ii. Incubate plate at 30°C for 3–4 days. (The patch should show abundant yeast growth.)iii. Scrape up a portion of the patch (~10 mm
for lysis (Step a, b, or c below). a. From a solid patch of growth: i. Spread a thin film of yeast Cell s (~2-cm2 patch) onto the appropriate SD agar medium. ii. Incubate plate at 30°C for 3–4 days. (The patch should show abundant yeast









