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- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 英文名:
RT-LAMP kit for influenza A virus subtype 22
- 库存:
100
- 供应商:
上海邦景
- 规格:
50次
产品运输:标本运送应采用 2-8℃冰袋运输,严禁反复冻融。
质控标准:
阴性质控品:无明显扩增曲线或无 Ct 值显示;
阳性质控品:扩增曲线有明显指数生长期,且 Ct 值≤32;
聚糖1(SDC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Syndecan 1 (SDC1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
载脂蛋白A4(APOA4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein A4 (APOA4) 48T/96T Sus scrofa; Porcine (Pig)
载脂蛋白D(APOD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Apolipoprotein D (APOD) 48T/96T Homo sapiens (Human)
补体成分5(C5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 5 (C5) 48T/96T Homo sapiens (Human)
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶1(ADAMTS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 1 (ADAMTS1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
补体成分8γ(C8γ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Complement Component 8g (C8g) 48T/96T Homo sapiens (Human)
血小板反应蛋白解整合素金属肽酶7(ADAMTS7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for A Disintegrin And Metalloproteinase With Thrombospondin 7 (ADAMTS7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
蛋白S(PROS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Protein S (PROS) 48T/96T Homo sapiens (Human)
色素上皮衍生因子(PEDF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Pigment Epithelium Derived Factor (PEDF) 48T/96T Homo sapiens (Human)
表面活性物质关联蛋白B(SPB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein B (SPB) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
表面活性物质关联蛋白C(SPC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Surfactant Associated Protein C (SPC) 48T/96T Bos taurus; Bovine (Cattle)
瘦素(LEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Leptin (LEP) 48T/96T Chicken (Gallus)
基质金属蛋白酶28(MMP28)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Matrix Metalloproteinase 28 (MMP28) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肌腱蛋白C(TNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Homo sapiens (Human)
甲型流感(禽流感)病毒22亚型RT-LAMP试剂盒肌腱蛋白C(TNC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Tenascin C (TNC) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
凝血因子ⅩⅢB肽(F13B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Coagulation Factor XIII B Polypeptide (F13B) 48T/96T Homo sapiens (Human)
膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Annexin A2 (ANXA2) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
膜联蛋白A2(ANXA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38; 2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+ 引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC最好随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是最末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列最好有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以最低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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文献和实验在 1 个小时内就可得出是否感染禽流感病毒的初步结论,从而为疫情的控制和相关应急措施的实施赢得极其宝贵的时间。 目前世界上已有的流感快速诊断试剂盒仅能鉴别出型,即有型的特异性,但无法鉴别出亚型,对于型内高致病性、低致病性和无致病性亚型却缺乏基本的识别能力。采用传统病原学检测方法 —— 鸡胚病毒培养法检测禽流感病毒需要数天时间,琼脂凝胶免疫扩散试验 (AGID) 需要 3 ~ 5 天,最快的 RT - PCR 也需要 4 小时以上,检测时间过长。 以 RT - PCR 法检测需要
实验室检测和快速诊断的标准如《GB/T 19438.1-2004禽流感病毒通用荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.2-2004 H5亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》、《GB/T 19438.3-2004 H7亚型禽流感病毒荧光RT-PCR检测方法》等。以上实时荧光定量PCR技术在禽流感检测方面的国家标准是该技术在当前的人感染猪流感诊断中应用的基础和前提。实时荧光定量PCR技术及在我国卫生应急中的应用要求实时荧光定量PCR技术(Real-time quantitative
人:郭元吉、王敏,联系电话:010-63534632,010-63581337,传真:(010)63534632。 五、标本检测方法 1.禽H5 病毒核酸检测 材料:疑似禽流感患者的咽、鼻拭子或含漱液,死亡病例的尸检肺组织、气管分泌物。 方法: RT-PCR,用于禽H5 亚型流感病毒的快速检测、测序及排除工作 试剂:特异性H5 及甲型流感病毒的引物、病毒RNA 提取试剂盒、逆转录酶、Taq DNA 聚合酶等试剂, 建议使用德国QIAGEN 的Rneasy Mini Kit (病毒
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