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人烟曲霉IgG抗体ELISA检测试剂盒说明书

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  • 西格
  • 用于检测血浆,血清及相关液体等样本
  • XG-H102116
  • 进口、国产
  • 2025年12月25日
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      上海西格

    • 库存

      20

    • 样本

      体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等

    • 标记物

      详见说明书

    • 适应物种

      大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物

    • 应用

      ELISA检测

    • 检测方法

      详见说明书

    • 检测范围

      用于检测血浆,血清及相关液体等样本

    • 规格

      48T/96T

    产品名称:人烟曲霉IgG抗体ELISA检测试剂盒说明书
    英文名称:Aspergillus funigatus IgG antibody
    检测范围:0.625ng/ml~20ng/ml
    灵敏度:0.1
    规格:96T/48T 
    保存;2-8℃。
    检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
    检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。

     
    产品细节图片1
     
    实验流程:
    1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
    2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
    3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
    4. 洗板3次;
    5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
    6. 洗板5次;
    7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
    8. 加终止液50µL,立即450nm读数。

    备试剂与收集血样:
    1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。
    2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
    3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
    4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)

    检测程序:
    1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
    2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
    3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
    4.  洗板:同前。
    5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
    6.  洗板:同前。
    7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗处反应15 分钟。
    8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
    9.  30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。

    性能:
    1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
    2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
    3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
    5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    6. 有效期:6个月

     
    产品细节图片2
     
    使用方法:
    测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
    1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。   24μg/ml    5号标准品    150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
     12μg/ml    4号标准品    150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
     6μg/ml     3号标准品    150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
     3μg/ml     2号标准品    150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
     1.5μg/ml   1号标准品    150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
    2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
    3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。   
    4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
    5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
    6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
    7. 温育:操作同3。
    8. 洗涤:操作同5。
    9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
    10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
    11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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    操作流程:
    (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 
    (2)酶标板置4℃,包被过夜。
    (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
    (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
    (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    (6)洗板,同(4)。 
    (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
    (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 
    (9)洗板,同(4)。 
    (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 
    (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
    (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
    (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研

     

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