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- 2025年07月15日
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文献和实验【原创】山寨Stratagene“QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kits”实验方案
。 7. 从每个平板上挑取6个克隆，提取质粒并进行酶切分析。鉴定无误后送交测序。 附件即为所引用的文献 实验中所用试剂： 1. PrimeSTARTM HS DNA polymerase，Takara，购自本地代理商 2. Dpn I ，Fermentas，购自上海生工 3. Cycle-pure Kit，Omega，购自本地代理商 4. 自制电感受态 5. MicroPulser Electroporation Apparatus（电转化仪），美国Bio
,我如果用该表达系统(大家都知道该系统有三个酶切位点:EcoR1 BamH1 和Sma1),那么还可以在引物上加上EcoR1 酶切位点吗? 8/我如果用PMD-18T克隆载体和GST表达系统,对引物设计有什么要求,该怎样设计,谢谢. 附:EcoR1 酶切位点:GAATTC Sma1酶切位点:CCCGGG BamH1酶切位点:GGATCC 这样,我的引物该怎样设计?十分感谢!!!!! 焦急地等待着您的答复
的酶对质粒进行酶切时,是不是要求该酶在目的基因序列中没有对应的酶切位点?5/在引物上加入酶切位点时,是不是要考虑表达载体中有相应的酶切位点和目的基因序列中没有此限制性酶切位点?6/通过软件分析,我得知该基因序列中有EcoR1酶的限制性酶切位点,那么设计引物时是不是就不能加入EcoR1酶酶切位点7/GST表达系统是不是能保持表达后的蛋白较高比率的活性,我如果用该表达系统(大家都知道该系统有三个酶切位点:EcoR1 BamH1 和Sma1),那么还可以在引物上加上EcoR1 酶切
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