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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验度提高了 1000 倍(见参考文献 [ 12 ] 的述评)。在大肠杆菌中,DNA 错配修复由 MutS 结合于错配位点引发,接着是 MutH 依赖于 MutL 的激活。激活的 MutH 在半甲基化的 d (GATC) 位点切开未甲基化的(即刚复制的)链 。这个位点可能在错配位点的上游或下游几百个碱基对处。切开的 DNA 链在螺旋酶 Ⅱ 的协助下,被四个核酸外切酶之一以外切方式降解,直到并超过错配位点。被移除的片段随后被 DNA 聚合酶 Ⅲ 和 DNA 连接酶合成新片段取代(和修复)。 MutH 是序列
相关专题 重组DNA技术工具酶 一、 限制性核酸内切酶及其应用 (一)限制性核酸内切酶的发现 当λ(k)噬菌体侵染E.coli B时,由于其DNA中有EcoB核酸酶特异识别的碱基序列,被降解掉。而E.coliB的DNA中虽然也存在这种特异序列,但可在EcoB甲基化酶的作用下,催化S-腺苷甲硫氨酸(SAM)将甲基转移给限制酶识别序列的特定碱基,使之甲基化。 Eco核酸酶不能识别已甲基化的序列
链上是不同的。 在 Ⅱ 型限制酶中还有一类特殊的类型,该酶只切割双链 DNA 中的一条链,造成一个切口,这类限制酶也称切口酶 (nicking enzyme),如 N.Bst NBI 。 Ⅰ 型(type Ⅰ)限制与修饰系统的种类很少,只占 1% ,如 EcoK 和 EcoB 。其限制酶和甲基化酶 (即 R 亚基和 M 亚基) 各作为一个亚基存在于酶分子中,另外还有负责识别 DNA 序列的 S 亚基,分别由 hsdR 、hsdM 和 hsdS 基因编码,属于同一操纵子(转录
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