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- 2025年07月08日
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文献和实验Protein G Purification of Antibodies
1. Reagent and Materials(1) Hi-Trap Protein G Column (Pharmacia Biotech #17-0404-01)(2) 20 mM Sodium Phosphate Buffer, pH 7.01.084 g NaH2PO4, anhydrous3.273 g Na2HPO4.7H2Oq.s. to 1 liter with di-H2O(3) 0.1M Glycine, pH 2.83.75 g Glycine1.4 ml HCl
HIS-tagged protein purification
John Mundy,Institute of Molecular Biology,Copenhagen,Denmark 1 liter cell prep 1)grow 20ml cells O/N37℃ dilute 50X into prewarmed LB,grow to 0.6 OD or about 1hr.Induce w/ 2mM IPTG (238mg/0.5l),grow 3hr,spin 6k GS3 10',freeze at 70℃ 2)resuspend
Protein A Purification of Antibody
1. Reagents(1) Affi-gel Protein-A Agarose (BioRad #153-6153)(2) MAPS II Binding Buffer (BioRad # 153-6161)(3) 0.314 g/ml diH2O(4) MAPS II Elution Buffer (BioRad #153-6162)(5) 0.023 g/ml diH2O(6) MAPS II Regeneration Buffer (BioRad #153-6166(7) 1M
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