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高质量DNA获取方法之月桂酸钠法

离心20min后取出，小心吸取上清液16mL于新灭菌的50ml抽提试管中； （6）向上述抽提试管中加入12mL异丙醇，上下缓慢颠倒数次，有白色絮状沉淀析出，颠倒时注意往一个方向，防止沉淀散开，不利于后续实验； （7）将白色絮状沉淀用枪头从抽提试管中轻轻挑出，至于2mL EP管中； （8）向上述2mL EP管中加入1.8mL70%乙醇，反复轻轻震荡洗涤，4°C，12000 rpm，高速离心15min，弃上清，重复此步骤两次； （9）将得到的白色沉淀再次4°C，12000 rpm短暂

Western Blot(免疫印迹法)步骤

；Aprotinin,leupeptin,pepstatin:1 microgram/ml each；Na3VO4: 1 mM；NaF: 1 mM 3. 1X SDS 样品缓冲液：62.5 mMTris-HCl(pH 6.8 于 25° C), 2% w/v SDS, 10%甘油,50 mMDTT, 0.01% w/v溴酚蓝 4. 转移缓冲液：25 mM Trisbase, 0.2 M 甘氨酸, 20%甲醇 (pH 8.3) 5. 10X Tris缓冲盐 (TBS)：准备1L

质粒DNA提取与琼脂糖凝胶电泳

分钟)。 【方法】 1. 接种细菌于5 ml LB液体培养基中，37 °C培养过夜。 2. 3000 rpm/min,离心15 min，弃上清。加入100 ul 溶液1悬起细菌沉淀。 3. 加入200 ul前新配制的溶液II ，颠倒EP管5次混合均匀，置冰浴2 min。 4. 加入150 ul溶液III温和地混匀，12000 rpm/min,离心5 min。 5. 吸取上清清亮裂解液放入另一新EP 管中，加