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- 2025年07月16日
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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验STANDARD PLANT MOLECULAR BIOLOGY PROTOCOLS
PROTEIN PURIFICATION 1) grow 20ml cells O/N 37 C, dilute 50X into prewarmed LB, grow to 0.6 OD or about 1hr. Induce w/ 2mM IPTG (238mg/0.5l), grow 3hr, spin 6k GS3 10'', freeze at -70 C. 2) extract cells (from 500ml) in 25 mls. Heintz Buffer
升到～8。4C放置1小时，菌液上层变澄清，摇动发现体系没有变粘。测pH仍在8左右。再37C保温1小时，还没有变化，我简直不知如何才好了。 另一瓶200ml培养物，溶菌酶处理1小时后超声。条件：300W，超5秒停5秒，重复99次。菌液有变化，但很不明显。继续超声400次，从外观来看没有太大区别。我简直要说***了。见鬼了。 我的操作有什么地方不妥当，请各位指正。 溶菌酶的厂商要求是否很重要？ 我的诱导物来自1：20过夜培养物接种，37C生长3小时后30C诱导2小时（0.8mM IPTG
1小时，菌液上层变澄清，摇动发现体系没有变粘。测pH仍在8左右。再37C保温1小时，还没有变化，我简直不知如何才好了。 另一瓶200ml培养物，溶菌酶处理1小时后超声。条件：300W，超5秒停5秒，重复99次。菌液有变化，但很不明显。继续超声400次，从外观来看没有太大区别。我简直要说tmd了。见鬼了。 我的操作有什么地方不妥当，请各位指正。 溶菌酶的厂商要求是否很重要？ 我的诱导物来自1：20过夜培养物接种，37C生长3小时后30C诱导2小时（0.8mM IPTG）。 是否菌液
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