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辛酸-硫酸铵法从人血清中纯化IgG

一、实验目的1、初步掌握从血清中提取纯化IgG的方法步骤。2、了解辛酸-硫酸铵法纯化IgG 的原理。二、实验原理辛酸-硫酸铵法分两步进行。第一步用辛酸沉淀杂蛋白，辛酸为短链脂肪酸，在酸性条件下可沉淀血清或腹水中的白蛋白或其他非Ig蛋白质；第二步利用硫酸铵盐析将Ig沉淀下来，操作步骤如图3-10所示。经SDS-PAGE电泳检测能得到电泳纯度较高的Ig。三、仪器、原料和试剂1、仪器磁力搅拌器、离心机、低温冰柜。2、原料抗血清（兔抗鸡血清）。3、试剂(1) 乙酸-乙酸钠缓冲液：60mmol/L，pH

硫酸铵饱和度的常用表

3.5 100 0 2．调整硫酸铵溶液饱和度计算表（ 25℃ ） 在 25℃ 硫 酸 铵 终 浓 度 ，% 饱 和 度

辛酸/硫酸铵法提纯IgG

一、原理在酸性条件下( pH4.5)，非1gG的蛋白成份(包括白蛋白，部分Ig)，能被辛酸等短链脂肪酸沉淀，上清中剩余的蛋白主要为IgG，再用硫酸铵沉淀上清，即可获得纯度较高的IgG。辛酸/硫酸铵法比硫酸铵法能够获得更高纯度的IgG。二、材料与方法1、材料（1）动物腹水（2）辛酸(caprylic acid，CA)，化学纯（3）硫酸铵，分析纯（4）SPA Sepharose 4FF亲合层析柱2、操作方法（1）蛋白含量测定紫外分光光度法测样品在波长260nm，280nm处的I及收光度(A 260