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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验. Wear gloves throughout.Poly(A)-RNA preparation can be done using cellulose-bound oligo-dT (Aviv and Leder, 1972; Chirgwin et al., 1979), but several other carriers for the oligo-dT molecules have been developed, e.g. streptavidin-coupled magnetic beads
亲和素(Streptavidin-HRP conjugate),室温震荡孵育45min。(勿将酶标记物直接加到膜上) (4)去掉酶联物稀释液,用洗涤缓冲液洗膜三次,每次室温轻微震荡1 0min。 (5)配置反应底物,均匀加至膜上,室温孵育5min。(可以在加完底物后,用薄膜轻轻覆盖在膜上,是底物均匀覆盖,注意不要产生气泡) (6)化学发光成像系统曝光成像(曝光时间的长短可以根据检测方法不同而进行相应调整)。 三、实验结果展示(美国Signosis EMSA实验结果) 四、Super-Shift
放置。 (2)用洗涤缓冲液润洗膜。 (3)加入15ml封闭缓冲液,室温振荡30min。 (4)用1ml封闭缓冲液稀释15μl辣根过氧化物酶标记链霉亲和素(Streptavidin-HRP conjugate),加入显色盒中(不要将酶稀释液直接加在膜上),室温继续振荡45min。 (5)倒掉封闭缓冲液,用洗涤缓冲液洗涤三次,每次室温振荡10min。 (6)等体积的混合Substrate A和B。 (7)将膜放在一个平板上,用1ml底物溶液覆盖整张膜。(为了确保底物溶液在整张膜上分布均匀,可以再滴加了底物
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