Fitzgerald 代理商|65R-S122 STREPT

How to isolate mRNA(分离mRNA)

. Wear gloves throughout.Poly（A）-RNA preparation can be done using cellulose-bound oligo-dT （Aviv and Leder, 1972; Chirgwin et al., 1979）， but several other carriers for the oligo-dT molecules have been developed, e.g. streptavidin-coupled magnetic beads

凝胶迁移实验（EMSA）实验方法

亲和素（Streptavidin-HRP conjugate），室温震荡孵育45min。（勿将酶标记物直接加到膜上） （4）去掉酶联物稀释液，用洗涤缓冲液洗膜三次，每次室温轻微震荡1 0min。 （5）配置反应底物，均匀加至膜上，室温孵育5min。（可以在加完底物后，用薄膜轻轻覆盖在膜上，是底物均匀覆盖，注意不要产生气泡） （6）化学发光成像系统曝光成像（曝光时间的长短可以根据检测方法不同而进行相应调整）。 三、实验结果展示（美国Signosis EMSA实验结果） 四、Super-Shift

酵母遗传学方法3：RNA的分离

沉淀，用 80 ％乙醇洗涤。真空干燥后，溶于 2.5ml 蒸馏水中，溶解后加入 2.5ml 2 ×上样缓冲液，同时加 SDS 至终浓度为 0.3 ％。 2． 置 65 ℃保温 5 分钟。 3． 装一个 oligo （ dT ）柱，用 1 ×上样缓冲液洗 3 次。 4． 用 10mmol/L HEPES （ pH7 ）洗脱 Poly （ A ）＋ RNA 。如果希望得到更满意的结果，可用加入 RNase 抑制剂。 5． 用蒸馏水对 Poly