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文献和实验定量分析,这样子我认为可以找出两个蛋白在功能上的不同点,但前提是这两个蛋白都是转录因子。 另外如果用抗体封闭,貌似对A蛋白的功能也会构成影响。 望战友明确说明研究目的。欢迎拍砖。 yuqw2002 一种是找B的专门的抑制剂,查查看有没有,如果没有的话,试着做 domain negative ,看外源表达的A活性的增加引起细胞的什么变化 897004 可以让B的活性结构域所对应的DNA序列定点
后还有好多翻译后修饰,比如说翻译后的甲基化、磷酸化等等,还有蛋白分子的聚合和解聚合,也会导致蛋白分子量和翻译后的有很大的差别。这些修饰和聚合会对蛋白的分子量影响很大。 好多蛋白都是这样子,发挥功能更的蛋白和最初合成的蛋白分子量相差比较大。我最近研究的一个分子就是这样子,在不同的文献上对去分子量的描述不一样,看过大量资料以后才知道:就是由于修饰后的功能蛋白的分子量变大的结果。所以想最近通过western blotting 来做个 验证。祝你成功。 另外也顺便请教一个问题
我现在正在做的是AFLP方面的东西,结果检测必须要做变性胶电泳才能看到,但是前一阵子我做的一直不顺,条带少,我试着减少引物的筛选个数和降低退火温度结果还是这样,一时不知道从何处找原因,想求教你的是 1、先看看我前两天做的变性胶电泳图片,条带太少,我看到的文献都是说条带在50到100的样子,为什么我跑的是这样子的呢,我做了减少引物的筛选碱基的个数和降低退火温度,结果还是差不多,请问各位做过AFLP的或者是跑变性聚丙烯酰胺的高手,指点一下问题可能出在什么方面,怎么去解决呢 2、做变性胶所用
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