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- Biolegend
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- 2025年07月09日
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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验cDNA 扩增模板所需的RNA 的最少量是多少？ 答：虽然我们用SMART 技术可以从10ng 的总RNA 中构建文库，但我们推荐原始材料最少是50ng 总RNA 或者25ng poly A + RNA。从而保证SMART cDNA 群质量更高，基因代表性更强。 问：我可以改变SMARTTM寡苷酸序列吗？ 答：任何一种寡苷酸序列的改变都会影响cDNA 合成和扩增的效率。SMARTⅡ和SMART Ⅳ寡 苷酸的序列和设计都是受专利保护的。
Transgenic Mouse Core Facility
pellet in 100ul 10mM Tris, 0.1mM EDTA. Put through a millipore basket filter as described above. 4.Quantitate/Validate DNA Make a 1:50 dilution and read A260/A280 on spectrophotometer with the microcuvette. (Pure DNA A260/A280=1.8) Cut 1 ug insert
分钟收集细胞； 5. 将上一步离心得到的细胞沉淀，重悬至扩增培养基中，并进行计数。 1.3 细胞刺激（次日） 扩增培养基成分：RPMI1640 + 10% 血清 + 5ug/ml anti-mouse CD28（克隆号：37.51） + 双抗 1. 将细胞浓度调整至 1-2×10^6/ml（本次实验为 2×10^6/ml，该浓度偏大）； 2. 从 4°C 冰箱取出前一天包被的板子，弃掉包被液，无菌PBS洗涤3遍； 3. 每孔加入 500μl 细胞悬液，放置于 37°C 含 5% CO2 细胞
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