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文献和实验为了证明Bioteke公司SYBR GREEN I实时荧光定量产品的质量，我们用国际知名品牌TaKaRa的SYBR® Premix Ex Taq™ (Perfect Real Time)实时荧光定量进行对比，在相同的模板、引物和反应体系下，用Bio-Rad荧光定量PCR仪进行了对比实验。 实验材料 小鼠肝脏组织 山东大学实验室提供样品cDNA 实验方法 RNA提取：Bioteke RNApure高纯总
ThermoScript或AMV，以18S rRNA基因特异性引物，由10ng大豆总RNA在所示温度合成cDNA。将1/10的cDNA反应产物使用高保真Platinum Taq DNA聚合酶进行40个PCR反应循环。 表2. 逆转录保温温度 Reverse Transcriptase Incubation Temperature AMV 37°C-45°C M-MLV 37°C SuperScript™II RT
缓冲液进行连接，在室温孵育1小时即可完成。延长孵育时间可增加转化克隆菌数目。一般4℃过夜连接可产生最多的转化子。 表1.部分热稳定性DNA聚合酶所产生的PCR产物特性的比较。 热稳定性DNA聚合酶 特性 Taq/ AmpliTaq®
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