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亲和层析

分子在纯化时若无商品化的亲和填料可供选择，也可以利用预活化填料，按照说明书介绍的流程，自行偶联生物分子到填料上，形成独有的亲和填料，来分离纯化其对应的生物分子，如酶/底物、抗原/抗体等。如需要纯化某种单抗，可以将相应的抗原偶联到预活化填料NHS activated Sepharose 4FF或CNBr activated Sepharose 4FF上，然后通过亲和层析实验，就可以实现抗体的高纯度纯化。偶联配基时，需要考虑活化基团是否与填料匹配，以及填料本身是否带有间隔臂。如果偶联的配基是蛋白

【转帖】看到了一篇好的蛋白纯化凝胶选择的综述，与大家分享

，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%。只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分钟至半小时完成。Sephadex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计，预装柱HiTrap Desalting（5ml）可用针筒操作。HiPrep Desalting(26ml)可在数分钟为多至10ml样品脱盐。 16.疫苗纯化 使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF

选择纯化凝胶的具体方法

蛋白质脱盐而设计，预装柱HiTrap Desalting（5ml）可用针筒操作。HiPrep Desalting(26ml)可在数分钟为多至10ml样品脱盐。 16.疫苗纯化 使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%。柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。目前使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。 17.抗生素聚合物分析