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文献和实验Phosphate Buffered Saline(PBS)(3)Wash Buffer:1×PBS,0.1%Tween-20(Santa cruz biotechnology,sc-29113)(4)Phorbol 12-myristate13-acetate(PMA)(Sigma 79346)(5)钙离子载体Ionomycin(SigmaI 9657) 二、设备 1. AID EliSpot Readerclassic(Autoimmun Diagnostika GmbH) 三
【原创】转载Western Blot 内参选择攻略(美季生物技术有限公司)http://www.majorbio.cn/NewsInfo.asp?id=289
的检测是有很大的影响,买抗体前要好好熟悉自己的目的蛋白,很多抗体杂不出条带其实未必是抗体质量的问题。很多公司的内参抗体是用抗原片段制备的,不同的公司选择的片段不一样。以最常用的beta-actin为例,有的公司选择N-端,有的选择C-端。选用N-端Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys 16aa作为抗原制备抗体(单抗和多抗)的占大多数,主要有santa cruz(Cat# sc-69879),sigma(Cat
肝刺激因子对人肝癌细胞BEL-7402 p21ras表达的影响
[22]介绍的方法进行Ras蛋白杂交。简要为: NC膜于4℃、5%脱脂奶粉(安怡高钙脱脂奶粉, 新西兰)TBST溶液中封闭过夜; 先后与抗H-Ras单克隆抗体(1∶100, sc-35, 美国Santa Cruz公司)及辣根过氧化物酶标记抗大鼠IgG(1∶1?000, 美国Santa Cruz公司)室温下孵育各1 h。之后, 将膜充分漂洗, 迅速加入发光试剂(美国Santa Cruz公司)进行发光自显影; 曝光于X光片上的自显影信号强度经密度扫描仪(GS-700,美国Bio-Rad公司)扫描并经
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