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文献和实验性和颗粒直径的变化。 图4 优质胶体金与劣质(不稳定)胶体金 如果还原过程中核化作用及形成速度没有得到很好控制,粒子的形成就会不均一。(见图4),所见的粒子可能具有不同的大小及形状(如椭圆形、三角形、长方形、菱形等等)。这样的粒子在与蛋白的结合过程中将无法被均匀包被,也不能在溶液中均匀分布。最终将影响产品的颜色、敏感性、特异性及稳定性。仅仅5%形状不均一的粒子都会影响测试的结果,使其完全不具重现性。与代表着制作精良的40nm的单分散性胶体粒子的樱桃红色相比,由“劣质金”所形成的信号常可见到淡蓝
标记物。40nm大小的颗粒被认为是最适于层析检测的。这种大小的尺寸既足够大到易于识辨又足够小到不会对蛋白结合到胶体金表面产生空间位阻从而优化标记原材料的性能。随着颗粒尺寸的增加,其辨识性也有所增加。最初的研究表明,应用60nm的胶体金可以增加某些检测中末端信号的辨识性,从而有可能提高测试的敏感性。图3 尺寸分布对比数据表明标记40 nm的胶体金平均直径达143nm硝酸纤维素膜 这种硝酸纤维素膜的一个重要特征就是其孔径的大小可以控制蛋白结合的有效表面积及样品通过测试条带的毛细管流速。劣质胶体金
( 一 ) 胶体金的颜色 溶胶的颜色取决于分散相物质的颜色、分散相物质的分散度和入射光线的种类,是散射光线还是透射光,粒子越小,分散度越高,则散射光的波长越短。对同一种物质的水溶胶来说,粒子大小不同,呈现的颜色亦不同。如胶体金颗粒在5~20nm之间,吸收波长520nm,呈红色的葡萄酒色;20~40nm之间的金溶胶主要吸收波长530nm的绿色光,溶液呈深红色;60nm的胶体金溶胶主要吸收波长600nm的橙黄色光,溶液呈蓝紫
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